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低-密度脂蛋白膽-固醇(LDL-C)測試盒 生化試劑

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低-密度脂蛋白膽-固醇(LDL-C)測試盒,培養(yǎng)液樣本:吸取培養(yǎng)液,1000 轉/分鐘,離心 10分鐘,取上清測定。

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低-密度脂蛋白膽-固醇(LDL-C)測試盒

(直接法 微板法)

一、試劑組成及配制(96T):

2.png

 

二、測定步驟:

1、樣本處理:

①、血清(漿)直接測定,如超過線性范圍用生理鹽水稀

釋后測定。

②、培養(yǎng)液樣本:吸取培養(yǎng)液,1000 /分鐘,離心 10

分鐘,取上清測定。

[]:一般建議細胞密度在 100 萬個/mL 以上。

③、組織樣本:準確稱取組織重量,按重量(g):體積

(mL)=19 的比例,加入 9 倍體積的勻漿

介質,冰水浴條件下機械勻漿,2500 /

分,離心 10 分鐘,取上清液待測。

[]:1、如組織樣本為非高脂樣本,勻漿介質統(tǒng)一用磷酸

鹽緩沖液(0.1mol/L pH 7.4)或生理鹽水進行提取。

2、如組織樣本為高脂樣本或部分為高脂樣本,勻漿

介質可統(tǒng)一用無水乙醇進行提取。

④、細胞樣本:

A、細胞收集:將制備好的細胞懸液取出,1000 /

分,離心 10 分鐘,棄上清液,留細胞沉淀;用

等滲緩沖液(推薦 0.1mol/L 、pH77.4 磷酸鹽

緩沖液)清洗 12 次,同樣 1000 /分,離心

10 分鐘,棄上清液,留細胞沉淀;

B、細胞破碎:加入 0.20.3mL 的勻漿介質(推薦

0.1mol/L、pH77.4 磷酸鹽緩沖液或生理鹽水)

進行勻漿,冰水浴條件下超聲破碎(功率:300W,

35 /次,間隔 30 秒,重復 35 )或手動勻

漿,制備好的勻漿液不離心直接測定。也可采

用裂解液裂解(推薦 TritonX-100,12%,裂解

3040 分鐘),裂解好的液體不離心直接測定。

[]:一般建議細胞密度在 100 萬個/mL 以上。破碎好的

液體可顯微鏡觀察細胞是否破碎

七、參考文獻:

1 、 G Schectman,M Patsches,EA Sasse.Clin.Chem.May

1996;42:732-737.

 低-密度脂蛋白膽-固醇(LDL-C)測試盒

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