谷-氨酰胺合成酶(GS)測定試劑盒 生化試劑
- 型 號:
- 參考價:0~0
谷-氨酰胺合成酶(GS)測定試劑盒,主要存在于植物中,是生物體內(nèi)氨同化的關(guān)鍵酶之一,催化銨離子和谷-氨酸合成谷-氨酰胺,不僅可以防止過多的銨離子對生物的毒性,而且谷-氨酰胺也是氨的主要儲存和運(yùn)輸形式。
谷-氨酰胺合成酶(GS)測定試劑盒
(比色法)
一、測定意義
谷-氨酰胺合成酶(Glutamine synthetase,GS)主要存在于植物中,是生物體內(nèi)氨同化的關(guān)鍵酶之一,催化銨
離子和谷-氨酸合成谷-氨酰胺,不僅可以防止過多的銨離子對生物的毒性,而且谷-氨酰胺也是氨的主要儲存和運(yùn)輸形式。
二、測定原理
GS 在 ATP 和 Mg 2+的存在下,催化銨離子和谷-氨酸合成谷-氨酰胺;谷-氨酰胺進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為γ-谷氨?;惲u肟酸,在酸性條件下形成的絡(luò)合物在 540nm 處有吸收峰,可用分光光度計(jì)測定其吸光值來判定 GS 的活力。
三、所用儀器與耗材
可見光分光光度計(jì)、恒溫水浴鍋、離心機(jī)、1mL 玻璃或石英比色皿、研缽、蒸餾水等
四、試劑組成和配置(24T)
提取液:30mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:12mL×1 瓶,-20℃保存。使用時 37℃預(yù)熱 20min,充分混勻,如有沉淀,靜置 10min,取上清待用。
試劑二:12mL×1 瓶,-20℃保存。使用時 37℃預(yù)熱 20min,充分混勻,如有沉淀,靜置 10min,取上清待用。
試劑三:粉劑×2 瓶,-20℃保存。使用時每瓶粉劑加入 5mL 蒸餾水充分溶解待用。
試劑四:15mL×1 瓶,4℃保存。
五、樣本前處理
1、 組織:按照組織重量(g):提取液體積(mL)為 1:10 的比例混合后,冰水浴勻漿,4000 轉(zhuǎn)/min 離心 10min,取上清置冰上待測。
2、 血清(漿):直接取樣測定。
3、 細(xì)胞、細(xì)菌或組織樣品:收集細(xì)胞或細(xì)菌于離心管中,離心后棄上清,按照細(xì)胞或 細(xì)菌數(shù)量(10 4個):提取液體積(mL)為 500:1 的比例混合,超聲波破碎細(xì)胞或細(xì)菌(條件:冰浴、功率 20%或 200W、超聲3s、間隔 10s、重復(fù) 30 次)后待測。
谷-氨酰胺合成酶(GS)測定試劑盒