尿酸(UA)檢測試劑盒(磷鎢酸微板法) 生化試劑
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尿酸(UA)檢測試劑盒(磷鎢酸微板法),是樣本中的尿酸在堿性條件下被磷鎢酸氧化為尿-囊-素和二氧化碳,磷鎢酸被還原成藍(lán)色化合物——鎢藍(lán),鎢藍(lán)生成量與尿酸含量呈正比,通過分光光度比色法(酶標(biāo)儀)測定 600~660nm 吸光度,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線求得 UA 含量,該試劑盒可用于檢測無溶血、無乳糜的血清樣本中尿酸的含量。
尿酸(UA)檢測試劑盒(磷鎢酸微板法)
產(chǎn)品簡介:
尿酸(UA)測
尿酸(UA)檢測試劑盒(磷鎢酸微版法)檢測原理是樣本中的尿酸在堿性條件下被磷鎢酸
氧化為尿-囊-素和二氧化碳,磷鎢酸被還原成藍(lán)色化合物——鎢藍(lán),鎢藍(lán)生成量與尿酸含量呈
正比,通過分光光度比色法(酶標(biāo)儀)測定 600~660nm 吸光度,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線求得 UA 含
量,該試劑盒可用于檢測無溶血、無乳糜的血清樣本中尿酸的含量。該試劑盒僅用于科研領(lǐng)
域,不適用于臨床診斷或其他用途。
自備材料:
1、蒸餾水或生理鹽水
2、離心管或小試管、離心機(jī)
3、96 孔板、酶標(biāo)儀
操作步驟(僅供參考):
1、準(zhǔn)備樣品:從待測樣本中分離出的血清或血漿不應(yīng)有溶血,直接檢測,如待測樣本濃度
過高,可用蒸餾水或生理鹽水稀釋后檢測,-20℃凍存。
2、配制 UA 工作試劑:按 UA Assay Buffer:UA 促進(jìn)劑=50:1 的比例混合,即成;4℃
保存 24H 有效。
3、UA 加樣:取 96 孔板,按照下表設(shè)置空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、測定孔,溶液應(yīng)按照順序依次加 入,并注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的 UA 濃度過高,可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測定。
4、UA 檢測:充分混勻,室溫放置 5min,空白孔調(diào)零,酶標(biāo)儀測定 630nm 處標(biāo)準(zhǔn)孔、測定孔的吸光度(記為 A 標(biāo)準(zhǔn)、A 測定)。
計算:
血清(漿)尿酸(μmol/L)=(A 測定/A 標(biāo)準(zhǔn))×400
式中:A 測定=測定孔的吸光度
A 標(biāo)準(zhǔn)=標(biāo)準(zhǔn)孔的吸光度
400=尿酸標(biāo)準(zhǔn)(400μmol/L)
注意事項:
1、 測定各孔時各孔溫度均需達(dá)到室溫,否則影響結(jié)果。
2、 紅細(xì)胞內(nèi)存在多種非特異性還原物質(zhì),所以用血清或血漿測定比用全血好。
3、 不宜用草酸鉀作為抗凝劑。
4、 顯色后需準(zhǔn)時測定,放置時間過長易變濁。
5、 血清和尿液樣品中的尿酸室溫下可穩(wěn)定 3 天,尿液樣品冷藏后,可引起尿酸鹽沉淀,
可調(diào)節(jié) pH 值至 7.5~8.0,并將樣本加熱至 50℃,再行測定。
6、 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
有效期:6 個月有效;4℃運(yùn)輸,4℃保存。
附錄:參考標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍:測定尿酸標(biāo)準(zhǔn)在 400μmol/L 時,通過酶標(biāo)儀測定其
630nm 吸光度多在 0.15~0.45 之間。測定尿酸標(biāo)準(zhǔn)在 10、25、50、100、200、
400、600、800μmol/L 時吸光度,據(jù)此 作出其標(biāo)準(zhǔn)曲線如下:
注意:由于檢測儀器和操作手法等條件的不同,參考值范圍會有波動,該值僅供參考,
對于要求精確計算含量的,可進(jìn)行多點測定;根據(jù)測定經(jīng)驗顯示標(biāo)準(zhǔn)品濃度在 10
μmol/L 以下,標(biāo)準(zhǔn)品濃度在 600μmol/L 以上,標(biāo)準(zhǔn)曲線會有偏差。
尿酸(UA)檢測試劑盒(磷鎢酸微板法)