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支原體-染色液(Dienes) 生化試劑

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支原體-染色液(Dienes)是一種經(jīng)典的利用天青美藍(lán)染色檢測支原體污染的試劑,經(jīng)常用于培養(yǎng)的貼壁或懸浮細(xì)胞以及組織切片的細(xì)胞凋亡檢測,該試劑檢測細(xì)胞含量范圍一般為 0.1~1×106 之間,Dienes 染色液亦可用于泌尿生殖道感染細(xì)菌的染色鑒別。

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支原體-染色液(Dienes)

產(chǎn)品簡介:

支原體染色液(Dienes染色液)是一種經(jīng)典的利用天青美藍(lán)染色檢測支原體污染的試劑,

經(jīng)常用于培養(yǎng)的貼壁或懸浮細(xì)胞以及組織切片的細(xì)胞凋亡檢測,該試劑檢測細(xì)胞含量范圍一

般為 0.1~1×106 之間,Dienes 染色液亦可用于泌尿生殖道感染細(xì)菌的染色鑒別。該試劑

僅用于科研領(lǐng)域,不適用于臨床診斷或其他用途。

產(chǎn)品組成:

11.png

自備材料:

1、PBS 或生理鹽水

2、載玻片、蓋玻片

3、顯微鏡

操作步驟(僅供參考)

()貼壁細(xì)胞

1、取潔凈蓋玻片在 70%乙醇中浸泡 5 分鐘或更長時間,無菌超凈臺內(nèi)吹干或用無菌 PBS

或生理鹽水洗滌 3 次,再用細(xì)胞培養(yǎng)液洗滌 1 次。

2、將蓋玻片置于 6 孔板或其他培養(yǎng)皿內(nèi),接種細(xì)胞培養(yǎng)過夜,使融合率約為 50%~80%。

3、加入 Dienes 染色液覆蓋表面,孵育 1~2min。

4、棄染色液,PBS 或生理鹽水洗 2 次,每次 3min,吸盡液體。

5、顯微鏡下觀察。

()懸浮細(xì)胞

1、低速離心后吸去大部分液體保留約 50μl 液體,再緩緩懸起細(xì)胞,滴加至載玻片上,盡

量使細(xì)胞分布均勻。

2、稍晾干,使細(xì)胞貼在載玻片上不易隨液體流動。

3、加入 Dienes 染色液覆蓋表面,孵育 1~2min。

4、棄染色液,PBS 或生理鹽水洗 2 次,每次 3min,吸盡液體。

()懸浮細(xì)胞

1、用棉試子在載玻片上涂一層 Dienes 染色液,待干。

2、挑取細(xì)菌,置于載玻片上。

3、覆蓋玻片,密封,觀察菌落形態(tài)。

()支原體菌落

1、將

3、加入 Dienes 染色液覆蓋表面,孵育 1~2min。

4、棄染色液,PBS 或生理鹽水洗 2 次,每次 3min,吸盡液體。

染色結(jié)果:

支原體菌落呈藍(lán)色,L 型細(xì)菌菌落在短時間內(nèi)呈藍(lán)色,但 30~60min 后逐漸褪色,呈無色。

注意事項:

1、在為了獲得細(xì)胞沉淀的離心的過程中,對于特殊細(xì)胞,如果細(xì)胞沉淀不充分,可以適當(dāng)

提高離心力或延長離心時間。

2、如染色太深不宜觀察,可用蒸餾水將染液稀釋 50~300 倍。

3、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

有效期:12 個月有效。

支原體-染色液(Dienes)

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