高密度脂蛋白膽-固醇(HDL-C)測試盒 生化試劑
- 型 號:
- 參考價(jià):0~0
高密度脂蛋白膽-固醇(HDL-C)測試盒,原包裝試劑盒在 2℃~8℃避光保存,有效期為12 個(gè)月。開啟后 2℃~8℃避光保存,可穩(wěn)定一個(gè)月。
高密度脂蛋白膽-固醇(HDL-C)測試盒
( 直接法 分光光度計(jì)法)
一、操作過程:
1、樣本處理:
①、血清(漿):直接測定,如超過線性范圍用生理鹽水稀
釋后測定。
②、培養(yǎng)液樣本:吸取培養(yǎng)液,1000 轉(zhuǎn)/分,離心 10 分鐘,
取上清測定。[注]:一般建議細(xì)胞密度在 100 萬個(gè)/mL
以上。
③、組織樣本:準(zhǔn)確稱取組織重量,按重量(g):體積(mL)=1:
9 的比例,加入 9 倍體積的勻漿介質(zhì),冰水浴條件下
機(jī)械勻漿,2500 轉(zhuǎn)/分,離心 10 分鐘,取上清液待測。
[注]:如組織樣本為非高脂樣本,勻漿介質(zhì)統(tǒng)一用磷酸
鹽緩沖液(0.1mol/L pH 7.4)或生理鹽水進(jìn)行提取;如組
織樣本為高脂樣本或部分為高脂樣本,勻漿介質(zhì)可統(tǒng)
一用無水乙醇進(jìn)行提取。
④、細(xì)胞樣本:
A、細(xì)胞收集:將制備好的細(xì)胞懸液取出,1000 轉(zhuǎn)/分,
離心 10 分鐘,棄上清液,留細(xì)胞沉淀;用等滲緩
沖液(推薦 0.1mol/L 、pH7~7.4 磷酸鹽緩沖液)
清洗 1~2 次,同樣 1000 轉(zhuǎn)/分,離心 10 分鐘,棄
上清液,留細(xì)胞沉淀;
B、細(xì)胞破碎:加入 0.2~0.3mL 的勻漿介質(zhì)(推薦
0.1mol/L、pH7~7.4 磷酸鹽緩沖液或生理鹽水)
進(jìn)行勻漿,冰水浴條件下超聲破碎(功率:300W,3~
5 秒/次,間隔 30 秒,重復(fù) 3~5 次)或手動勻漿,
制備好的勻漿液不離心待測。也可采用裂解液裂解
(推薦 TritonX-100,1~2%,裂解 30~40 分鐘),
裂解好的液體不離心直接測定。[注]:建議細(xì)胞密
度在 100 萬個(gè)/mL 以上。破碎好的液體可顯微鏡觀
察細(xì)胞是否破碎
五、性能指標(biāo):
1、試劑空白管吸光度≤0.10。
2、線性范圍:0~5.16mmol/L,r 2>0.990。
3、靈敏度:測試 1.00mmol/L 被測物時(shí),吸光度值△A 大于
0.04。
4、準(zhǔn)確度:相對偏差≤10%。
5、精密度:CV≤3%,批間相對極差≤5%。
6、穩(wěn)定性:原包裝試劑盒在 2℃~8℃避光保存,有效期為
12 個(gè)月。開啟后 2℃~8℃避光保存,可穩(wěn)定一
個(gè)月。
六、注意事項(xiàng):
1、本產(chǎn)品僅用于科研,不得用于臨床診斷,切勿服用。
2、樣品含量如超出檢測范圍,可用生理鹽水稀釋樣
本后進(jìn)行測定,測定結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。
3、試劑防止葡萄糖、膽-固醇等試劑的污染。
4、試劑與樣本量可按照儀器要求,按比例增減。
5、樣本中 HDL-C 含量較低時(shí),可以加大樣本取樣量(如取
10μL 或 20μL,同時(shí)標(biāo)準(zhǔn)品需要稀釋相應(yīng)的倍數(shù)后和樣
本取樣量一致)后測定。
6、標(biāo)準(zhǔn)品粉劑為凍干粉,溶解時(shí)間較長,配置時(shí)可提前半
小時(shí)配制。
七、參考文獻(xiàn):
1、Nader Rifai,Thomas G.Cole,Elizabeth lannotti.
Clin.Chem.JuL 1998;44:1452-1458.
2 、 Y Okamoto, S Tanaka,H Nakano.Clin.Chem. Dec
1995;41:1784.
八、參考值:
大鼠血漿:0.45±0.16mmol/L
小鼠血漿:0.92±0.11 mmol/L
雞血漿:0.36±0.12(某些種類的能達(dá)到 2.33±0.38)mmol/L
魚血漿:0.99±0.22 mmol/L
小鼠肝臟:12.4±2.0 μmol/gprot
魚肝臟:39.36±12.37μmol/gprot
注:以上值僅供參考,并無臨床學(xué)意義。
高密度脂蛋白膽-固醇(HDL-C)測試盒