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兔抗綿羊紅細(xì)胞抗體 溶血素

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兔抗綿羊紅細(xì)胞抗體 溶血素
貨號:B2880
規(guī)格:1ml*5支
本產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)用,不做其它用途!

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兔抗綿羊紅細(xì)胞抗體 溶血素

貨號:B2880

規(guī)格:1ml*5支

成分:兔抗綿羊紅細(xì)胞溶血素

效價(jià):1:4000

保存:4-8℃(避光保存)

用途:科研、教學(xué)實(shí)驗(yàn)使用,如總補(bǔ)體溶血活性(CH50)檢測、補(bǔ)體結(jié)合實(shí)驗(yàn)(cft)等

產(chǎn)品規(guī)格:1ml/支

注意事項(xiàng):請穿戴實(shí)驗(yàn)服及一次性手套操作



血清總補(bǔ)體溶血活性(CH50)測定方法

一、原理

利用綿羊細(xì)胞與相應(yīng)抗體(溶血素)結(jié)合成的復(fù)合物,可激活血清中的補(bǔ)體,導(dǎo)致紅細(xì)胞溶解,當(dāng)紅細(xì)胞和溶血素量一定時(shí),在規(guī)定反應(yīng)的時(shí)間內(nèi),溶血程度與補(bǔ)體量及活性呈正相關(guān)。在接近50%溶血(CH50)時(shí),二者之間近似直線關(guān)系,故以50%溶血作為最敏感的判斷終點(diǎn)。以引起50%溶血所需的最小補(bǔ)體量為一個(gè)CH50U,可計(jì)算出待測血清中總的補(bǔ)體溶血活性,以CH50U/ml表示。

 本實(shí)驗(yàn)主要反映補(bǔ)體經(jīng)典活化途徑的溶血功能,其結(jié)果與補(bǔ)體C1~C9各組成分的量及活性均有關(guān)。

二、試劑及配制

1.緩沖-生理鹽水:

(1)貯存液:

     Na2HPO4.12H2O        2.85g

     KH2PO4               0.27g  

     NaCl                17.00g

     蒸餾水定容至100ml,4℃保存?zhèn)溆?/span>

(2)應(yīng)用液:5ml貯存液加95ml蒸餾水,再加10%硫-酸鎂0.1ml,當(dāng)日配制,12小時(shí)內(nèi)使用。

2.2%綿羊紅細(xì)胞:無菌采取綿羊血液,于等量Alsever液中可保存3周。用前以緩沖液洗3次,并配成2%細(xì)胞懸液。必要時(shí)可用吸光光度法或細(xì)胞計(jì)數(shù)法使懸液細(xì)胞濃度標(biāo)                準(zhǔn)化。

3.溶血素:將綿羊紅細(xì)胞溶血素(效價(jià)1:4000),用應(yīng)用液做1:2000倍稀釋(即1ml溶血素加1999ml應(yīng)用液)。

4.待測血清:新鮮血液室溫放置30min,再4℃放置60min,使血-塊收縮,4℃離心(3000r/min)10min,取上清,-20℃保存。

三、操作步驟

試管法(改良Mayer法)

1.致敏羊紅細(xì)胞:2%綿羊紅細(xì)胞加等量稀釋后的溶血素(1:2000),混勻,置37℃水浴30min。

2.稀釋血清:待測血清0.2ml,加應(yīng)用液3.8ml,稀釋度為1:20。

3.配制溶血標(biāo)準(zhǔn)管:全溶血管:2%綿羊紅細(xì)胞2ml加8ml蒸餾水,混勻。50%溶血管:取全溶血管液2ml加緩沖液2ml。

4.按表所示,依次加各成分于試管中,混勻,置37℃水浴30min



兔抗綿羊紅細(xì)胞抗體 溶血素


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