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組織細(xì)胞谷胱甘肽還原酶檢測(cè)試劑盒

  • 型   號(hào):
  • 參考價(jià):1.00~1.00

組織細(xì)胞谷胱甘肽還原酶檢測(cè)試劑盒是一種靈敏簡(jiǎn)單的利用比色法檢測(cè)谷胱甘肽還原酶(GR)活性的試劑盒。谷胱甘肽包括還原型谷胱甘肽(GSH)和氧化型谷胱甘肽(GSSG)。GSH 是細(xì)胞中巰基的主要來源,對(duì)于維護(hù)蛋白巰基適當(dāng)?shù)难趸€原狀態(tài)有重要作用。GR廣泛分布在各種組織細(xì)胞和體液中,可以還原GSSG生成GSH,維持細(xì)胞內(nèi)或體液中充足的GSH。

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組織細(xì)胞谷胱甘肽還原酶檢測(cè)試劑盒

GR可以將GSSG還原為GSH,GSH可以和DTNB反應(yīng)生成黃色的TNB和GSSG。在GSSG和DTNB相對(duì)過量的條件下,利用該反應(yīng)可以通過測(cè)定生成TNB的吸光度(A412nm)定量檢測(cè)GR活性。本試劑盒以GSH以TNB標(biāo)準(zhǔn)品和反應(yīng)時(shí)間定量GR酶活性。檢測(cè)線性范圍為4.7-150mU/ml,靈敏度≤4.7mU/ml。

適用范圍:本試劑盒能夠檢測(cè)培養(yǎng)細(xì)胞、實(shí)體動(dòng)物組織等多種其它生物樣本中的GR活性。

 

利用TNB標(biāo)準(zhǔn)品的量為橫坐標(biāo),吸光度值為縱坐標(biāo)制作標(biāo)準(zhǔn)曲線,并獲得橫縱坐標(biāo)之間的函數(shù)關(guān)系式,然后利用該標(biāo)準(zhǔn)曲線和各樣品的吸光度值計(jì)算樣品中一定時(shí)間段(注:計(jì)算酶活性的時(shí)間段采用5-15分鐘時(shí)間段,這樣可以避免樣品本身的顏色及樣品中較高濃度GSH和NADPH對(duì)反應(yīng)的干擾)內(nèi)產(chǎn)生的TNB量,從而換算為谷胱甘肽還原酶活力(注意精確計(jì)時(shí))。對(duì)于細(xì)胞和組織樣品,可以根據(jù)樣品中蛋白濃度測(cè)定,計(jì)算每毫克蛋白中谷胱甘肽還原酶活力。由于有多個(gè)時(shí)間點(diǎn)的測(cè)定,可以選擇時(shí)間線性良好的時(shí)間段計(jì)算谷胱甘肽還原酶活力。

谷胱甘肽還原酶定義:在25℃,PH 7.6條件下,每分鐘還原1.0μmol GSSG為GSH的谷胱甘肽還原酶為1 U,1 U=1000 mU。

      計(jì)算公式:酶活力(mU)=TNB生成量(nmol)/2/反應(yīng)時(shí)間(min)。

 

組織細(xì)胞谷胱甘肽還原酶檢測(cè)試劑盒

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