高脂樣本總膽固醇(TC)酶法測定試劑盒
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高脂樣本總膽固醇(TC)酶法測定試劑盒在實(shí)體組織和細(xì)胞內(nèi),膽固醇酯既是構(gòu)成細(xì)胞質(zhì)膜的成分,也是細(xì)胞內(nèi)脂滴的主要組分。細(xì)胞內(nèi)膽固醇過度聚集與動脈粥樣硬化泡沫細(xì)胞形成密切相關(guān)。實(shí)體組織和細(xì)胞的膽固醇測定遠(yuǎn)比血液膽固醇測定復(fù)雜。本試劑盒避免了有毒的有機(jī)溶劑抽提、繁雜的氮?dú)獯蹈珊椭|(zhì)復(fù)溶等步驟,采用高效能試劑裂解細(xì)胞和提取膽固醇,優(yōu)化了酶學(xué)反應(yīng)和操作步驟,簡單易行,靈敏度高,線性范圍20~5000 µm
所有產(chǎn)品僅供科研使用,不能用于食用和醫(yī)療等
高脂樣本總膽固醇(TC)酶法測定試劑盒
操作步驟;
一. 組織細(xì)胞裂解:
裂解前,組織或細(xì)胞用PBS洗滌2次去除殘存血液或培養(yǎng)基血清,以免影響膽固醇測定。
1)培養(yǎng)細(xì)胞裂解:
消化、離心收集細(xì)胞或直接在培養(yǎng)皿內(nèi)裂解。通常6孔板單孔約2x106個細(xì)胞,75cm2瓶約1x107細(xì)胞。按比例每1x106個細(xì)胞加0.1ml裂解液,震蕩混勻,靜置10分鐘。
2) 動物組織裂解:
切記要預(yù)先將新鮮組織剪切稱重后再進(jìn)行保存。組織凍存后再進(jìn)行解凍、剪切、稱重可能會產(chǎn)生嚴(yán)重的測量誤差。離心管精確稱重,加入組織塊后再稱重,二者相減(即減量稱重法)計(jì)算組織重量(約100mg)。強(qiáng)烈建議按比例每1mg組織加10µl裂解液以減少樣品間蛋白和脂質(zhì)含量變異而產(chǎn)生的誤差。(注意;裂解液用量在1ml或更多可保證有效的裂解與脂質(zhì)提?。S秒妱痈咚賱驖{器或手動玻璃勻漿器破碎組織。(不超聲方法,因其不能*和均勻破碎。應(yīng)根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)調(diào)整初始的組織細(xì)胞加入量),而后靜置10分鐘。
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