普魯士藍(lán)染色實驗代測 檢測服務(wù)
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普魯士藍(lán)染色實驗代測實驗樣本類型:石蠟切片主要用途:觀察組織內(nèi)鐵粒子的含量和定位信帆生物提供各類實驗代測服務(wù),更多服務(wù)項目歡迎致電咨詢,我們將竭誠為您服務(wù)!
普魯士藍(lán)染色實驗代測
普魯士藍(lán)染色簡介:
在酸性條件下,切片內(nèi)的高鐵鹽與亞鐵作用生成亞鐵氰化鐵(普魯士藍(lán)反應(yīng))。
鐵反應(yīng)是用來鑒別組織或細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)的黃棕色色素是屬于哪一種色素,入黑色素、脂褐素、甲醛色素還是含鐵血黃素。
染色步驟(僅供參考):
1、石蠟切片脫蠟至水;
2、蒸餾水洗兩次;
3、取等量2%亞鐵氫化鉀和2%鹽酸混合,染色30~45min;
4、蒸餾水洗,0.1%核固紅復(fù)染3min(染液用一段時間后調(diào)整為5min);
5、無水乙醇脫水(兩缸各5分鐘);
6、正丁醇30s;
7、二甲苯透明(兩缸各5min), 中性樹膠封片(封片過程中保證組織上的二甲苯不能干,否則在高倍顯微鏡下觀察易出現(xiàn)小水珠結(jié)晶)。
普魯士藍(lán)染色實驗代測
染色結(jié)果:
含鐵血黃素呈藍(lán)色,胞核呈紅色。
注意事項:
1、組織應(yīng)采用緩沖中性甲醛液固定,若用一般的甲醛液,則應(yīng)作短時間固定后即包埋切片,經(jīng)甲醛液固定的組織反應(yīng)不良。
2、鹽酸以分析純較好,因粗制鹽酸內(nèi)含有較多的鐵,可導(dǎo)致假陽性。
3、在操作過程中容器要干凈,避免使用鐵制工具(可用不繡鋼制工具)。
4、鐵反應(yīng)前的各步驟以蒸餾水沖洗,以防自來水內(nèi)的鐵離子與組織內(nèi)的鈣鹽結(jié)合產(chǎn)生假陽性反應(yīng)。
5、制作對照片時,取另一張相同連續(xù)切片脫蠟至水,置入5%的草酸中作用2~6小時,即可將含鐵血黃素溶去,再染普魯士藍(lán),鐵反應(yīng)陰性。
普魯士藍(lán)染色實驗代測