人甲狀腺結(jié)合前白蛋白(PA)天然高純抗原
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人甲狀腺結(jié)合前白蛋白(PA)天然高純抗原產(chǎn)品純度:純度95%儲存條件:-20℃有效期:12個月概述:經(jīng)過多種方法純化制備而得,可用于質(zhì)控品本產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)用,不做其他用途。
人甲狀腺結(jié)合前白蛋白(PA)天然高純抗原
產(chǎn)品純度:純度95%
儲存條件:-20℃
有效期:12個月
概述:經(jīng)過多種方法純化制備而得,可用于質(zhì)控品
背景介紹:
人甲狀腺結(jié)合前白蛋白(PA),也被稱為轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白(transthyretin, TTR),是一種由肝臟細(xì)胞合成并分泌到血漿中的蛋白質(zhì)。其分子量約為5.4萬,具有較短的半衰期,大約為1.9天。由于這一特性,前白蛋白在血漿中的濃度變化對于反映人體的營養(yǎng)狀況、肝功能狀態(tài)以及某些疾病的進(jìn)展具有較高的敏感性134。
作為甲狀腺素的結(jié)合蛋白,前白蛋白能夠與甲狀腺素(T4)結(jié)合,形成復(fù)合物,從而參與甲狀腺素的運(yùn)輸和調(diào)節(jié)。此外,前白蛋白還具備其他重要的生理功能,如結(jié)合并運(yùn)輸維生-素A,參與機(jī)體的免疫調(diào)節(jié)等。
人甲狀腺結(jié)合前白蛋白的天然高純抗原在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用價(jià)值。它不僅可以用于制備高靈敏度的檢測試劑,用于疾病的早期診斷和監(jiān)測,還可以作為研究蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能的重要工具
重組蛋白抗原制備常用的有原核表達(dá)系統(tǒng)、酵母表達(dá)系統(tǒng)、真核表達(dá)系統(tǒng),真核表達(dá)系統(tǒng)主要有昆蟲細(xì)胞-桿狀病毒表達(dá)和哺乳動物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)等。重組表達(dá)制備抗原一般會在蛋白序列加上一段用于純化的標(biāo)簽,除了便于純化還可以增加蛋白的可溶性和分子量更利于抗體制備,常用的標(biāo)簽主要有GST、6*His、Myc、MBP、Flag、Fc等。根據(jù)下游實(shí)驗(yàn)對蛋白質(zhì)的使用需求,如有需要可以切除標(biāo)簽;如不切除,后期抗體在使用時(shí)如遇標(biāo)簽抗體干擾,可先用標(biāo)簽蛋白免疫吸附去除高免血清中針對標(biāo)簽的抗體。重組蛋白與天然蛋白相比,在構(gòu)象、修飾和蛋白活性上還是有差距的,真核與原核相比,更接近于天然蛋白;這類抗原制備一般適合于Western Blot、IHC、ELISA以及免疫層析、膠體金和免疫比濁等診斷類抗體的制備,只不過制備的過程需要用含內(nèi)源性蛋白標(biāo)本進(jìn)一步篩選驗(yàn)證。
抗原制備重要的環(huán)節(jié)就是抗原的純化,通過重組蛋白制備抗原當(dāng)然也不例外,在項(xiàng)目開始之前這個難度往往被忽視,科研人員往往認(rèn)為既然在抗原設(shè)計(jì)的時(shí)候融合了純化標(biāo)簽,純化過程按照標(biāo)準(zhǔn)流程操作,得到高純度抗原就是水到渠成,然而結(jié)果往往不如人意;諸如,明明帶了標(biāo)簽的蛋白掛不上純化柱子、洗脫下來的蛋白雜帶比目的帶還多、目的蛋白結(jié)合在柱子上洗脫不下來等等。蛋白純化在業(yè)界都是一大難題,一個蛋白的純化往往會用到幾種方案和策略。根據(jù)福因德生物技術(shù)團(tuán)隊(duì)的經(jīng)驗(yàn),純化出一個符合抗體制備要求的重組抗原蛋白至少要用2-3種手段,常用的手段有離子交換層析、標(biāo)簽親和層析、凝膠過濾分離層析等等。
人甲狀腺結(jié)合前白蛋白(PA)天然高純抗原