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果膠酶測(cè)試盒 生化試劑

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果膠酶測(cè)試盒,水解果膠生成半乳糖醛酸,具有還原性醛基,與DNS試劑反應(yīng)生成紅棕色物質(zhì),在540nm有特征吸收峰,測(cè)定540nm處吸光值變化可計(jì)算得果膠酶活性。

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果膠酶測(cè)試盒

Pectinase Kit DNS 顯色法)

一、測(cè)定原理:

果膠酶水解果膠生成半乳糖醛酸,具有還原性醛基,

DNS試劑反應(yīng)生成紅棕色物質(zhì),在540nm有特征吸收峰,

測(cè)定540nm處吸光值變化可計(jì)算得果膠酶活性。

二、測(cè)定意義:

果膠酶(pectinase)是一類(lèi)分解果膠質(zhì)酶類(lèi)的總稱,包

括原果膠酶,果膠酯酶,多聚半乳糖醛酸酶和果膠裂解酶

四大類(lèi),廣泛存在于植物果實(shí)和微生物中,主要用于食品、

釀酒、環(huán)保、醫(yī)藥、紡織及日化用品行業(yè)。

三、自備儀器或用品:

天平、恒溫離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL玻璃比色皿

(光徑1cm)、恒溫水浴鍋。

四、試劑盒組成(50T/24 )

提取液:液體50mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體30mL×1 瓶,4℃保存。

試劑二:粉劑×2瓶,4℃保存。臨用前加入12.5mL試劑一,

50°加熱溶解,保存一周。

試劑三:液體30mL×1 瓶,4℃避光保存。

五、粗酶液提取:

1.組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)1510

比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)

行冰浴勻漿,10000g 4℃離心10min,取上清,置冰

上待測(cè)。

2.細(xì)菌、真菌:按照細(xì)胞數(shù)量(10 4個(gè)):提取液體積(ml

5001000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1ml提取

液),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300W,超聲3秒,

間隔7秒,總時(shí)間3分鐘);然后10000g,4℃離心10

分鐘,取上清置于冰上待測(cè)。

3. 細(xì)胞培養(yǎng)液:直接檢測(cè)。

八、注意事項(xiàng):

1. 試劑一若有沉淀析出,請(qǐng)置于50℃加熱溶解。

2. 測(cè)定之前請(qǐng)先做預(yù)實(shí)驗(yàn),如果吸光值較高或較低,請(qǐng)用提

取液做適當(dāng)?shù)南♂尰蛘呒哟髽颖玖?,并在?jì)算公式中乘以

稀釋倍數(shù)或者以實(shí)際加入的樣本體積參與計(jì)算。

3. 煮沸樣本建議在沸水中煮沸10分鐘,以將酶滅活。

 果膠酶測(cè)試盒

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