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如何才能做出高品質(zhì)免疫組化圖片

更新時間:2023-07-07   點擊次數(shù):428次

如何才能做出高品質(zhì)免疫組化圖片

 



免疫組化:根據(jù)抗原抗體反應(yīng)和化學顯色原理,組織切片中的抗原先和一抗結(jié)合,再利用一抗與標記、熒光素等的二抗進行反應(yīng),前者再用標記辣根過氧化物酶(HRP)或堿性磷酸酶(AKP)等的抗(如鏈霉親和素等)結(jié)合,后通過光學顯微鏡或熒光顯微鏡下可清晰看見細胞內(nèi)發(fā)生的抗原抗體反應(yīng)產(chǎn)物,從而進行對抗原進行定位。

免疫組化(IHC)實驗代測

結(jié)果展示:

1.預(yù)實驗結(jié)果 確認抗體稀釋倍數(shù)和樣本情況

 

 
 2.正式結(jié)果圖片:提供染好的片子,結(jié)果以掃片形式提供,老師可查看任意視野,倍數(shù)也可任意調(diào)節(jié)。


 

3.實驗結(jié)果分析(片子分析需另外收費,可選做)


 實驗要求:

客戶需自備一抗,本公司可代為購買一抗。
客戶需提供詳細的樣品資料(如組織來源等),以便于實驗的順利進行。 
技術(shù)部將在收到標本后15-20個工作日之內(nèi)將作好的片子交于客戶。

送樣運輸要求:

注意事項:
1)石蠟切片制片,組織取樣后應(yīng)立即放入固定液中,避免凍存;
2)冰凍切片制片應(yīng)取用新鮮組織,以免抗原丟失;

3)組織蠟塊可以保存很長時間,但是石蠟切片理論上不能超過半年。冰凍切片不能超過3個月

我們承諾免免疫組化相關(guān)技術(shù)人員操作規(guī)范,并設(shè)立完備的陰性對照,為您提供高質(zhì)量的免疫組化檢測結(jié)果。

免疫組化服務(wù)內(nèi)容和流程:

1.組織標本固定好后,我們開始組織脫水、石蠟包埋、石蠟切片;

2.常規(guī)染色(HE染色)或特殊病理染色(masson、PAS染色等);

3.免疫組化檢測;

4.圖片拍照、圖片分析、數(shù)據(jù)統(tǒng)計。且拍片位置準確、效果好,免去您自己花大量時間坐在顯微鏡前拍片的煩惱。


免疫組化實驗服務(wù)

您需提供:固定好的樣本、石蠟塊均可,一抗;

我們提供:免疫組化實驗報告、免疫組化結(jié)果圖片、實驗結(jié)果的分析和統(tǒng)計(陽性率分析);

實驗周期:2周。


一抗的選點和技巧

(1)單克隆和多克隆抗體的選擇。單克隆和多克隆抗體的內(nèi)在特征決定了它們用于IHC/ICC時的優(yōu)勢和限制。單克隆抗體由單個B細胞克隆產(chǎn)生,代表了同質(zhì)群體,能夠高親和力高特異性地與單個表位結(jié)合。這在檢測蛋白家族的某個成員時特別有用,因為蛋白家族有著高比例的氨基酸同源性。

抗體結(jié)合往往依賴于目標蛋白維持其天然的構(gòu)想狀態(tài)。與其他蛋白的相互作用、翻譯后修飾、溫度、pH、固定和鹽濃度都會影響抗體接近目的表位。多克隆抗體是異質(zhì)的,可識別多個表位,因此它們較少受到蛋白構(gòu)象變化的影響。

一般而言,多克隆抗體在一定pH和鹽濃度范圍內(nèi)也比單克隆抗體更為穩(wěn)定。基于這些原因,多克隆抗體更常用于IHC/ICC實驗。

(2)應(yīng)用范圍的選擇。有的一抗只能用于Western Blotting,或免疫組化、免疫熒光、免疫沉淀等;甚至表明石蠟切片或冰凍切片。

(3)種屬反應(yīng)性的選擇。這一點很重要,表明這種抗體可能存在種屬差異,且這種抗體適合檢測哪種種屬動物體內(nèi)的抗原。

(4)種屬來源,一般兔來源的多是多克隆;而小鼠來源的多是單克隆,但也有另外。根據(jù)此來源來選擇相應(yīng)的二抗。

(5)生產(chǎn)廠家的選擇。



尊敬的客戶:
本公司有放射免疫技術(shù)服務(wù)、蛋白質(zhì)組學服務(wù)、免疫組化、PCR技術(shù)服務(wù)、生物信息學數(shù)據(jù)分析等,如果您想了解免疫組化的更多內(nèi)容或者其他服務(wù)信息,您可以本公司的服務(wù)熱線了解更多產(chǎn)品的詳細信息,至善至美的服務(wù)是我們永無止境的追求,歡迎新老客戶放心選購自己心儀產(chǎn)品,我們將竭誠為您服務(wù)!


上海信帆推出免疫組化實驗代測服務(wù)


 

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