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信帆生物為您分享:尼羅紅如何染油脂細(xì)胞

更新時(shí)間:2021-12-17   點(diǎn)擊次數(shù):2130次

信帆生物為您分享:尼羅紅如何染油脂細(xì)胞

尼羅紅


規(guī)格:100mg

英文名稱:Nile Red

別名:尼羅絲;9-(Diethylamino)benzo[a]phenoxazin-5(5H)-one;Nile Blue A Oxazone

CAS7385-67-3

分子式:C20H18N2O2

分子量:318.37

純度:≥95%

外觀:墨綠色粉末

溶解性:1mg/mL in EtOH

熒光光譜Ex/Em530nm/635nm

保存條件:RT,避光,有效期3年。

產(chǎn)品說(shuō)明:

尼羅紅是一種親脂性的惡嗪類熒光染料,對(duì)光敏感,與脂類物質(zhì)結(jié)合并發(fā)出熒光,在激發(fā)波長(zhǎng)530nm激發(fā)下,顯示強(qiáng)烈桔紅色熒光。同時(shí)在紫外光的照射下顯示紅色。另外,也可用于蛋白質(zhì)染色。

產(chǎn)品說(shuō)明:

一、工作液制備

1)母液準(zhǔn)備:取適量的尼羅紅用無(wú)水 DMSO 充分溶解制備 1mM 儲(chǔ)存液,按照單次用量分裝凍存,避免反復(fù)凍融,避光保存。

2)工作液準(zhǔn)備:用 HHBS 或生理緩沖液,pH 7將母液按 1:1000 稀釋為尼羅紅工作液,漩渦混勻。

【注】:尼羅紅的實(shí)際染色濃度請(qǐng)參考文獻(xiàn)或?qū)嶒?yàn)室體系來(lái)調(diào)整。

二、染色步驟

1)用檢測(cè)化合物處理細(xì)胞一段時(shí)間;

2)離心并調(diào)整細(xì)胞濃度為 1-5×105cell/管;

3)用 500µl 尼羅紅工作液重懸細(xì)胞;

4)室溫或 37oC避光孵育 5-10min

5)吸掉染色工作液,用 HHBS 或適當(dāng)緩沖液清洗細(xì)胞;

6)用500µl 預(yù)熱的 HHBS 或培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,使細(xì)胞密度為 1-5×105cell/管;

7)熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光信號(hào),Ex/Em = 552/636 nm

【注】

對(duì)于貼壁細(xì)胞,可用 HHBS 或適當(dāng)緩沖液清洗細(xì)胞,然后直接加入尼羅紅工作液孵育。

細(xì)胞也可預(yù)固定,然后用尼羅紅工作液染色。

注意事項(xiàng):

1)本品僅供科研實(shí)驗(yàn)用,不得用于其它。

2)為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。


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