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直接抗人球蛋白試劑,現(xiàn)貨供應(yīng)

更新時(shí)間:2020-06-19   點(diǎn)擊次數(shù):790次

直接抗人球蛋白試劑,現(xiàn)貨供應(yīng)

通用名稱:直接抗人球蛋白試劑盒

英文名稱:Direct Anti-human Globulin Reagents

[包裝規(guī)格]   抗IgG,C3d(多特異性)   10ml/支,1支/盒

             抗IgG                  5ml/支,1支/盒

             抗C3d                  5ml/支,1支/盒

[預(yù)期用途] 抗球蛋白試驗(yàn)(Coombs試驗(yàn))是測定結(jié)合在紅細(xì)胞上的抗體和/或補(bǔ)體的主要方法。直接Coombs試驗(yàn)是檢測體內(nèi)已被抗體和/或補(bǔ)體致敏的紅細(xì)胞。間接Coombs試驗(yàn)通過血清與細(xì)胞的孵育,證實(shí)抗體和/或補(bǔ)體與紅細(xì)胞在體外的結(jié)合。根據(jù)醫(yī)療器械體外診斷試劑注冊分類,本試劑暫時(shí)只用于直接抗球蛋白試驗(yàn)。不同抗人球蛋白試劑的用途見表1。

表1 不同抗人球蛋白試劑的用途

試    劑

用   途

抗IgG,C3d

(多特異性)

抗IgG

抗C3 d

直接抗球蛋白試驗(yàn)

自身免疫溶血性貧血的研究

新生兒溶血病的研究

-

輸血反應(yīng)的研究

藥物致敏紅細(xì)胞的研究

[檢驗(yàn)原理]  抗體分子和補(bǔ)體成份都是球蛋白。用人球蛋白免疫動物使其產(chǎn)生抗體即抗人球蛋白??谷饲虻鞍自噭┛赡蝗饲虻鞍字旅舻募t細(xì)胞??谷饲虻鞍自噭┛梢院椭旅粼诩t細(xì)胞上人球蛋白反應(yīng),通過橋梁作用使致敏紅細(xì)胞出現(xiàn)凝集,呈現(xiàn)陽性反應(yīng)。

試驗(yàn)過程中如果存在血清,其中的游離球蛋白極易中和抗人球蛋白試劑,使試驗(yàn)出現(xiàn)假陰性結(jié)果,因此紅細(xì)胞必須經(jīng)過充分洗滌。

[適用范圍] 自身或同種免疫溶血性疾病的研究。

[主要組成成分] 直接抗人球蛋白試劑盒有三種規(guī)格,不同批號試劑盒中各組份可以互換:

抗IgG,C3d(多特異性) 10ml/支,1支/盒;

    抗IgG               5ml/支,1支/盒;

    抗C3d               5ml/支,1支/盒;

試劑組成成分如下:

抗IgG,C3d(多特異性):高效價(jià)抗IgG,高效價(jià)抗C3d,氯化鈉,,磷酸氫二鈉,穩(wěn)定劑;

抗IgG:高效價(jià)抗IgG,氯化鈉,,磷酸氫二鈉,穩(wěn)定劑;

抗C3d:高效價(jià)抗C3d,丙種球蛋白(10%),氯化鈉,,磷酸氫二鈉,穩(wěn)定劑。

[儲存條件及有效期] 2-8℃保存,請勿反復(fù)凍融。

儲存條件下有效期為24個(gè)月。

 

[樣本要求]

應(yīng)用EDTA抗凝標(biāo)本,可反映體內(nèi)紅細(xì)胞被補(bǔ)體致敏的真情況。若懷疑冷抗體引起的直接抗球蛋白試驗(yàn)陽性,其血液標(biāo)本凝固應(yīng)保持在37℃,直到血清被分離出來為止。

[檢驗(yàn)方法]

1.     標(biāo)本的收集:見[樣本要求]

2.     直接抗球蛋白試驗(yàn):

2.1 將1滴受檢者3%紅細(xì)胞懸液加入干凈的小試管中(75×12mm),用鹽水洗滌3次[以3400轉(zhuǎn)/分(1000g),離心1分鐘]。每次洗滌后,將上清液全部倒出。

2.2 加入2滴抗IgG, C3d (多特異性)或抗IgG或抗C3d,以3400轉(zhuǎn)/分(1000g),離心15秒,用肉眼或借助光鏡觀察凝集,并按程度記錄結(jié)果。

2.3 判斷結(jié)果須持一定角度輕輕地?fù)u動試管直到松動所有的細(xì)胞,然后反復(fù)傾斜試管,直到均勻的細(xì)胞懸液(陰性)或者凝集物(陽性)為止。

2.4 如陰性結(jié)果,在室溫中放置5-10分鐘,再離心一次,重讀結(jié)果。這樣做,陰性反應(yīng)有時(shí)會變成陽性。

    注意:僅對C3d和IgA致敏紅細(xì)胞有增強(qiáng)作用,IgG致敏細(xì)胞反而會變?nèi)酰ㄒ娮⒁馐马?xiàng))。

3.     陽性對照(IgG抗D致敏細(xì)胞):

3.1 每批新的試劑,或在4℃保存時(shí)間過長,需做陽性對照試驗(yàn),至少每月一次。1滴陽性對照細(xì)胞加2滴直接抗人球蛋白試劑,離心判定結(jié)果。

3.2 在試驗(yàn)中,于判為陰性的試管內(nèi)加入1滴陽性對照細(xì)胞,再離心,然后重懸浮,判定結(jié)果。如果zui初洗滌能充分除去所有未結(jié)合的球蛋白,結(jié)果為陽性。這是一個(gè)重要的對照,因?yàn)檫@是檢測細(xì)胞是否洗滌充分的*方法。

3.3 陽性對照細(xì)胞(IgG抗D致敏細(xì)胞)制備: 1份市售抗D(IgG)試劑(效價(jià)≥1:8)+1份Rh(D)陽性O(shè)型紅細(xì)胞混勻,370C水浴30分鐘,用生理鹽水三洗,配成3%紅細(xì)胞懸液,當(dāng)天使用。

[檢驗(yàn)結(jié)果的解釋] 

陽性反應(yīng)——出現(xiàn)紅細(xì)胞凝集。表示紅細(xì)胞上有相應(yīng)抗體存在。

陰性反應(yīng)——紅細(xì)胞不凝集。表示紅細(xì)胞沒有相應(yīng)抗體存在。

[檢驗(yàn)方法的局限性]某些文獻(xiàn)報(bào)告指出使用抗IgG測定抗體偶爾會失敗,可依靠含有抗C3成分的多價(jià)抗球蛋白試劑測定。沒有被IgG 測得的抗體在某些病例中可能有意義。抗IgG可用在抗體篩選和相容性試驗(yàn)中,但必須認(rèn)識到它的局限性。

[產(chǎn)品性能指標(biāo)]

1.抗IgG

1.1外觀:澄清透明,無雜質(zhì);

1.2靈敏度試驗(yàn):分別與強(qiáng)抗體[抗D(IgG)],中等強(qiáng)度抗體(抗Jka)和弱抗體(抗Fya)致敏細(xì)胞反應(yīng),結(jié)果均為陽性;

1.3效價(jià): 與IgG (抗D)致敏細(xì)胞凝集效價(jià)≥1:4;

1.4 特異性試驗(yàn):

1.4.1陰性對照試驗(yàn):與加入AB血漿的Rh(D)陽性細(xì)胞反應(yīng),結(jié)果為陰性。

1.4.2陽性對照試驗(yàn):與抗D(IgG)致敏細(xì)胞反應(yīng),結(jié)果為陽性。

2.抗C3d

2.1外觀:澄清透明,無雜質(zhì);

2.2效價(jià): 與C3致敏細(xì)胞凝集效價(jià)≥1:4;

2.3特異性試驗(yàn)

2.3.1陰性對照試驗(yàn):與加入抗D(IgG)的Rh(D)陽性細(xì)胞反應(yīng),結(jié)果為陰性。

2.3.2陽性對照試驗(yàn):與10%蔗糖溶液致敏細(xì)胞反應(yīng),結(jié)果均為陽性。

3.抗IgG,C3d

3.1外觀:澄清透明,無雜質(zhì);

3.2靈敏度試驗(yàn):分別與強(qiáng)抗體[抗D(IgG)],中等強(qiáng)度抗體(抗Jka)和弱抗體(抗Fya)致敏細(xì)胞反應(yīng),結(jié)果均為陽性;

3.3效價(jià): 與IgG (抗D)致敏細(xì)胞凝集效價(jià)≥1:4;

與C3致敏細(xì)胞凝集效價(jià)≥1:1;

3.4特異性試驗(yàn)

3.4.1陰性對照試驗(yàn):與加入AB血漿的Rh(D)陽性細(xì)胞反應(yīng),結(jié)果為陰性。

3.4.2陽性對照試驗(yàn):與抗D(IgG)致敏細(xì)胞反應(yīng),結(jié)果為陽性;

與10%蔗糖溶液致敏細(xì)胞反應(yīng),結(jié)果均為陽性。

[注意事項(xiàng)] 

1.紅細(xì)胞洗滌不充分,微量殘留的未結(jié)合的球蛋白將要中和抗人球蛋白試劑。

2.直接抗球蛋白試驗(yàn)的試管在初讀結(jié)果之后,再放在室溫中5-10分鐘。這樣孵育之后,若細(xì)胞被C3d或IgA所致敏時(shí),重新離心觀察結(jié)果可使陰性試驗(yàn)轉(zhuǎn)變?yōu)殛栃越Y(jié)果。而IgG致敏的紅細(xì)胞在孵育以后可能反應(yīng)更弱。

3.試劑含有0.1%W/V疊氮鈉。如果攝入會中毒。

直接抗人球蛋白試劑,現(xiàn)貨供應(yīng)

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