催乳素(PRL)放免試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng),PRL放免實(shí)驗(yàn)代測(cè)
更新時(shí)間:2019-11-28 點(diǎn)擊次數(shù):735次催乳素(PRL)放免試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng),PRL放免實(shí)驗(yàn)代測(cè)
催乳素是由垂體前葉分泌的蛋白激素,分子量為 2200dt。在雌激素、孕激素、皮質(zhì)類固 醇作用的基礎(chǔ)上,催乳素對(duì)泌乳的開(kāi)始和維持起著重要作用,娠后血清催乳素逐漸增 加,至分娩前達(dá)到高峰,哺乳期進(jìn)一步增加,催乳素的測(cè)定,對(duì)診斷垂體疾病,如垂體 瘤和泌乳綜合癥的診斷有重要價(jià)值,對(duì)月經(jīng)異常和不孕癥的診斷有重要意義。
本品采用了第二抗體+聚已二醇沉淀法放射免疫分析試驗(yàn)原理:含催乳素(PRL)的樣品 和 125I 標(biāo)記的催乳素(PRL)與相應(yīng)的抗體反應(yīng)形成抗原抗體復(fù)合物。反應(yīng)后加入二抗及 PEG,使免疫復(fù)合物沉淀,離心,測(cè)沉淀放射性計(jì)數(shù)。通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線得到樣本中催乳素 (PRL)的濃度。
本試劑盒標(biāo)準(zhǔn)品濃度采用 WHO 1st IRP75/504,與 WHO2nd IS83/562 的換算關(guān)系為: 1ng/ml(1st IRP)=21mIU/ml(2nd IS83/562)
2、 質(zhì)控血清:兩瓶,1.0 ml/瓶 濃度為: L:9.89±2.73 ng/ml H:50.08±10.07ng/ml
3、抗 PRL 抗體: 一瓶,綠色溶液,2~8℃冷存。
4、 125I-PRL: 一瓶,< 88.23 kBq/瓶,紅色溶液,2~8℃冷存。
5、 分離劑:一瓶,藍(lán)色溶液,充分搖勻后使用,2~8℃冷存。
[儀器] 1、 γ-計(jì)數(shù)器 2、低溫離心機(jī)
操作方法 I
1、 將實(shí)驗(yàn)所需試劑及樣本放置室溫,平衡至少 30 分鐘以上才可進(jìn)行操作;
2、 取 60X12mm 聚苯乙烯管進(jìn)行編號(hào),所有實(shí)驗(yàn)均做雙管重復(fù);
3、 取每個(gè)濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控血清和樣本 100µl 加入相應(yīng)編號(hào)的試管中;
4、 每管均各加入 200µl 標(biāo)記物工作液;
5、 每管均各加入 200µl 抗體工作液,充分混勻;
6、 37℃溫育 180 分鐘;
7、 每管均各加入 500µl 分離劑后,充分混勻;
8、 室溫放置 5~10 分鐘后,離心 3500 轉(zhuǎn)/分,20 分鐘后,吸去或傾倒掉上清液;
9、用 γ-計(jì)數(shù)器測(cè)定各管計(jì)數(shù)CPM. 檢測(cè)時(shí)間: 1 分鐘
10、從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀取樣本及質(zhì)控血清的濃度。
[實(shí)驗(yàn)過(guò)程中應(yīng)注意] 1、 γ-計(jì)數(shù)器本底計(jì)數(shù)應(yīng)≤100CPM/分,效率應(yīng)≥75%;
2、 加入放射性標(biāo)記物時(shí),應(yīng)做好防護(hù)、小心謹(jǐn)慎,以避免造成放射性污染;
3、 如果某一個(gè)樣本的測(cè)定值高于高濃度的標(biāo)準(zhǔn)品濃度,用零標(biāo)準(zhǔn)品以 1:2 或 1: 4 的比例稀釋樣本后重新測(cè)試,測(cè)試結(jié)果乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
[質(zhì)量控制] 每次實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)至少采用兩個(gè)濃度的質(zhì)控血清進(jìn)行質(zhì)量控制,以確保每次實(shí)驗(yàn)測(cè)定結(jié)果 的可靠性。
1、 質(zhì)控血清的平均值應(yīng)在允許范圍內(nèi);
2、 曲線方程應(yīng)采用佳擬合方式;
3、 重復(fù)樣本的測(cè)定結(jié)果相差在 15%以內(nèi)。 如不能同時(shí)滿足以上條件,則此次試驗(yàn)結(jié)果無(wú)效,全部試驗(yàn)需重新進(jìn)行。
催乳素(PRL)放免試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng),PRL放免實(shí)驗(yàn)代測(cè)