表皮生長(zhǎng)因子(EGF)elisa試劑盒簡(jiǎn)介
更新時(shí)間:2017-10-04 點(diǎn)擊次數(shù):937次表皮生長(zhǎng)因子(EGF)elisa試劑盒簡(jiǎn)介
表皮生長(zhǎng)因子(Epidermal growth factor,EGF)是zui早發(fā)現(xiàn)的生長(zhǎng)因子, 對(duì)調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)、 增殖和分化起著重要作用。在人類(lèi),表皮生長(zhǎng)因子蛋白有53個(gè)氨基酸殘基,三個(gè)二硫鍵,質(zhì)量6千道耳頓。
基本信息
中文名稱
表皮生長(zhǎng)因子
外文名稱
Epidermal augmentum factor
別 稱
epidermal growth factor
簡(jiǎn) 稱
EGF
性 質(zhì)
一種小肽
作 用
多功能的生長(zhǎng)因子
發(fā)現(xiàn)時(shí)間
1974年
表皮生長(zhǎng)因子(EGF)elisa試劑盒還可以這么操作
1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃ 過(guò)夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔)。
3、加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~1小時(shí),洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。
5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽(yáng)性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽(yáng)性。
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