忍不住要分享大鼠肝細胞生長因子elisa試劑盒有關(guān)知識
更新時間：2017-06-14 點擊次數(shù)：830次本試劑盒只能用于科學研究，不得用于醫(yī)學診斷大鼠(Rat)肝細胞生長因子(HGF)ELISA檢測檢測原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被肝細胞生長因子(HGF)抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的肝細胞生長因子(HGF)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值)，計算樣品濃度。樣品收集、處理及保存方法1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。3. 細胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。自備物品1. 酶標儀(450nm)2. 高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3. 37℃
恒溫箱操作注意事項
1. 試劑盒保存在2-8℃，使用前室溫平衡20 分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶，這屬于正?，F(xiàn)象，水浴加熱使結(jié)晶*溶解后再使用。
2. 實驗中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中，密封(低溫干燥)保存。
3. 濃度為0 的S0 號標準品即可視為陰性對照或者空白；預(yù)處理后OD 值。結(jié)果判斷繪制標準曲線：在Excel 工作表中，以標準品濃度作橫坐標，對應(yīng)OD 值作縱坐標，繪制出標準品線性回歸曲線，按曲線方程計算各樣本濃度值。
試劑盒性能
1. 準確性：標準品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R 值，大于等于0.9900。
2. 靈敏度：zui低檢測濃度小于1.0 pg/mL。
3. 特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
4. 重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。
5. 貯藏：2-8℃，避光防潮保存。
6. 有效期：6 個月
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