已超過百萬閱讀量的細(xì)胞培養(yǎng)技巧,你還不點(diǎn)開看看?
更新時(shí)間:2017-03-27 點(diǎn)擊次數(shù):840次已超過百萬閱讀量的細(xì)胞培養(yǎng)技巧,你還不點(diǎn)開看看?
細(xì)胞培養(yǎng)的路上,有多虐心就有多少要注意的地方。大家擦干眼淚,聽小編幾句話。希望我所說的能幫助你細(xì)胞培養(yǎng)的路上,少一點(diǎn)污染,多一點(diǎn)快樂!
一: 細(xì)胞方面
1. 買細(xì)胞要去靠譜的地方買,一般上面會有針對細(xì)胞的介紹,這樣培養(yǎng)之前可以了解細(xì)胞正常生長的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類型等。
2. 不管是買的細(xì)胞,還是別人惠贈的細(xì)胞,剛拿到手趕緊的做兩件事:檢測是否有支原體污染;迅速擴(kuò)增凍存,凍存細(xì)胞復(fù)蘇后第二天更換一次培養(yǎng)基。
3. 發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有污染迅速處理掉,特別是當(dāng)你養(yǎng)了很多種細(xì)胞時(shí)。細(xì)菌污染、真菌污染很容易發(fā)現(xiàn),支原體污染的話,細(xì)胞會長的慢,可以買個(gè)支原體檢測的試劑盒定期檢測一下。
4. 不同細(xì)胞生長周期不同。有的生長很快,比如說 MDA-MB-231,傳代的時(shí)候取離心懸液的十分之一就已經(jīng)足夠了。有的又是特別慢,比如 BT474,傳代是一分二,復(fù)蘇起始的時(shí)候兩周多才能長滿。這就需要要在培養(yǎng)細(xì)胞的過程中多多摸索。
5. 對于嬌弱的細(xì)胞,就得細(xì)心呵護(hù)。胰酶消化不能過久,吹得時(shí)候要輕柔,離心時(shí)候也要注意轉(zhuǎn)速和時(shí)間。每天都要去看一下細(xì)胞,肉眼觀察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀察細(xì)胞生長狀況。記住,是每天。
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二: 操作方面
1. 不要和別人共用試劑耗材,自己準(zhǔn)備一套。自己的東西自己包自己烘干。槍頭什么的只要有可能污染就換。
2. 嚴(yán)格無菌操作。操作臺一定要擺個(gè)酒精燈,所有操作緊密圍繞在酒精燈周圍進(jìn)行。離開過操作臺的東西再進(jìn)操作臺之前一定要用酒精消毒一遍,稍微烤一下,別直接放到火上,離一段距離。包括一切實(shí)驗(yàn)耗材、儀器、以及你帶著手套的手。
3. 水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,記得要勤換。身體的各個(gè)部分盡量的少接觸不需要接觸的地方的地方。比如實(shí)驗(yàn)臺,又比如培養(yǎng)箱內(nèi)部。培養(yǎng)箱隔一段時(shí)間*用酒精棉擦洗一次。
4. 細(xì)胞房日常的值日清潔是必須的,此外還要定期熏蒸。晚上離開的時(shí)候給細(xì)胞房照紫外,超凈臺是用完就開。的是同一時(shí)間就你一個(gè)人在細(xì)胞房養(yǎng)細(xì)胞。
5. 動作要既輕柔又有力。動作太重會有一堆一堆的氣泡,動作太輕就吹不下來。剛開始的時(shí)候吹細(xì)胞太痛苦了,稍微一下就起泡。后來就是吹的時(shí)候槍里的培養(yǎng)基不要一次全都壓出來,留一點(diǎn),槍的zui頭部盡量深的在液面以下。
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ELISA試劑盒:進(jìn)口ELISA試劑盒,國產(chǎn)ELISA試劑盒,人elisa試劑盒,大鼠ELISA試劑盒,小鼠ELISA試劑盒等。
培養(yǎng)基:微生物培養(yǎng)基,顯色培養(yǎng)基,BD培養(yǎng)基,gibco培養(yǎng)基等。
血清:胎牛血清,人血清,動物血清,NQBB,Hyclone,Gbico原裝血清 。
生物試劑:Amresco,Sigma,ABM,BIO-RAD,BD,ABCAM等進(jìn)口試劑。
標(biāo)準(zhǔn)品對照品:進(jìn)口對照品,進(jìn)口對照藥材,進(jìn)口標(biāo)準(zhǔn)品.
抗體:一抗,二抗,流式抗體等。
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實(shí)驗(yàn)室代測服務(wù):放免代測,WB實(shí)驗(yàn),免疫組化代測,熒光定量PCR代測,病理細(xì)胞染色代測,生化實(shí)驗(yàn)代測等。