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血清對細(xì)胞生長具有促進(jìn)作用

更新時間:2016-12-30   點擊次數(shù):1225次

   血清對于在傳統(tǒng)培養(yǎng)基配方中生長和增殖的大多數(shù)細(xì)胞系來說是需要的,因為大多數(shù)單獨的培養(yǎng)基并不能提供細(xì)胞生長所需要的全部營養(yǎng),如MEM培養(yǎng)基,較為常用的量為8%~10%的比例,原代培養(yǎng)使用量為15%~20%,而特殊的低血清培養(yǎng)基血清量可降至3%左右,細(xì)胞的形態(tài)和功能不受影響。

   用于細(xì)胞培養(yǎng)的血清主要是牛血清,培養(yǎng)某些特殊細(xì)胞也用人血清、馬血清等,如造血干細(xì)胞分化培養(yǎng),馬血清是必加成分之一。選擇用牛血清培養(yǎng)細(xì)胞的原因主要是來源充足、制備技術(shù)成熟、經(jīng)過長時間的應(yīng)用考驗人們對其有比較深入的理解。

   牛血清分為小牛血清、新牛血清、胎牛血清。小牛血清取自出生10~30天的小牛;新牛血清取自出生24 小時之內(nèi)的新生牛;胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛。顯然,胎牛血清是品質(zhì)zui高的,因為胎牛還未接觸外界,血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對細(xì)胞有害的成分zui少。牛血清對絕大多數(shù)哺乳動物細(xì)胞都是適合的,但并不排除在培養(yǎng)某種細(xì)胞時使用其他動物血清更合適。牛血清中含有豐富的細(xì)胞生長必須的營養(yǎng)成份,具有極為重要的功能。

   血清是非常復(fù)雜的混合物,成分多樣,對細(xì)胞生長具有促進(jìn)作用

1)提供基本營養(yǎng)物質(zhì),如氨基酸、維生素、無機(jī)物、脂類物質(zhì)、核酸衍生物等,是細(xì)胞生長必須的物質(zhì);

2)提供激素和各種生長因子,如胰島素、腎上腺皮質(zhì)激素(氫化可的松、地塞米松)、類固醇激素(雌二醇、酮、孕酮)、成纖維細(xì)胞生長因子、表皮生長因子、血小板生長因子等;

3)提供結(jié)合蛋白,可攜帶重要的低分子量物質(zhì),如白蛋白攜帶維生素、脂肪、以及激素等,轉(zhuǎn)鐵蛋白攜帶鐵,在細(xì)胞代謝過程中起重要作用;有些情況下結(jié)合蛋白能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到解毒作用;

4)血清能提供促接觸和伸展因子,使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷,對培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用;

5)能夠維持培養(yǎng)基的pH 值,起酸堿緩沖液作用;

6)有一些細(xì)胞,如內(nèi)皮細(xì)胞、骨髓樣細(xì)胞可以釋放蛋白酶,血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用。這種作用是偶然發(fā)現(xiàn)的,現(xiàn)在則有目的的使用血清來終止胰蛋白酶的消化作用。因為胰蛋白酶已經(jīng)被廣泛用于貼壁細(xì)胞的消化傳代;

7)血清蛋白形成了血清的粘度,可以保護(hù)細(xì)胞免受機(jī)械損傷,特別是在懸浮培養(yǎng)攪拌時,粘度起到重要作用;

8)血清還含有一些微量元素和離子,它們在代謝穩(wěn)定和解毒中起重要作用。

但是血清的加入也帶來了很多問題:

1)血清的成分可能有幾百種之多,目前對其準(zhǔn)確的成分、含量及其作用機(jī)制仍不清楚,尤其是對其中一些多肽類生長因子、激素和脂類等尚未充分認(rèn)識,這給研究工作帶來許多困難;

2)血清都是批量生物試劑,各批量之間差異很大,這種差異來源于不同的制備方法和除菌方法、動物的年齡差別及血清的儲存條件等,而且與取血動物的來源關(guān)系密切。不同的牧場、不同的氣候天氣及其他環(huán)境因素都可能影響血清的質(zhì)量。要保證每批血清的相似性極為困難,從而使實驗的標(biāo)準(zhǔn)化和連續(xù)性受到限制。因此選好了一種血清就要盡可能使用它。在需要更換時,也要盡量保持與原有的一批血清相似。現(xiàn)在很多公司都提供血清預(yù)留,你一旦選定了某個批次的血清,備足一年的量,這樣可以避免很多麻煩;

3)對大多數(shù)細(xì)胞,在體內(nèi)狀態(tài),血清不是它們接觸的生理學(xué)液體,只是在損傷愈合以及血液凝固過程中才接觸血清,因此使用血清有可能改變某種細(xì)胞在體內(nèi)的正常狀態(tài),血清可能促進(jìn)某些細(xì)胞的生長(成纖維細(xì)胞)同時抑制另一類細(xì)胞生長(表皮細(xì)胞);

4)血清含一些對細(xì)胞產(chǎn)生毒性的物質(zhì),如多胺氧化酶,能與來自高度繁殖細(xì)胞的多胺反應(yīng)(如精胺、亞精胺)形成有細(xì)胞毒性作用的聚精胺,補(bǔ)體、抗體、細(xì)菌毒素等都會影響細(xì)胞生長,甚至造成細(xì)胞死亡;

5血清取材中可能帶入支原體、病毒,如具有爭議的黑膠蟲,對細(xì)胞產(chǎn)生潛在影響;

6)大規(guī)模生物試劑中,血清來源越來越困難,價格昂貴,是構(gòu)成生物試劑成本的主要部分之一。

 

上海信帆生物公司主要代理產(chǎn)品:
ELISA試劑盒:進(jìn)口ELISA試劑盒,國產(chǎn)ELISA試劑盒,人elisa試劑盒,大鼠ELISA試劑盒,小鼠ELISA試劑盒等。
培養(yǎng)基:微生物培養(yǎng)基,顯色培養(yǎng)基,BD培養(yǎng)基,gibco培養(yǎng)基等。
血清:胎牛血清,人血清,動物血清,NQBB,Hyclone,Gbico原裝血清 。
生物試劑:Amresco,Sigma,ABM,BIO-RAD,BD,ABCAM等進(jìn)口試劑。
標(biāo)準(zhǔn)品對照品:進(jìn)口對照品,進(jìn)口對照藥材,進(jìn)口標(biāo)準(zhǔn)品.
抗體:一抗,二抗,流式抗體等。
放免試劑盒:進(jìn)口放免試劑盒,國產(chǎn)放免試劑盒,進(jìn)口美國鳳凰等放免試劑盒。
實驗室代測服務(wù):放免代測,WB實驗,免疫組化代測,熒光定量PCR代測,病理細(xì)胞染色代測,生化實驗代測等。

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