信帆生物:影響ELISA實(shí)驗(yàn)檢測(cè)的內(nèi)在因素
更新時(shí)間:2016-07-08 點(diǎn)擊次數(shù):778次影響ELISA實(shí)驗(yàn)檢測(cè)的內(nèi)在因素有哪些,信帆生物為您解答!
內(nèi)源性物質(zhì)干擾解決方案:
有人認(rèn)為大約 40% 的人血清標(biāo)本中含有非特異性干擾物質(zhì),可以不同程度影響檢測(cè)結(jié)果。常見(jiàn)的干擾物質(zhì)有:類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、嗜異性抗體、嗜靶抗原自身抗體、醫(yī)源性誘導(dǎo)的抗鼠 Ig (s) 抗體、交叉反應(yīng)物質(zhì)和其它物質(zhì)等。
(1)類風(fēng)濕因子 人血清中 IgM、IgG 型類風(fēng)濕因子(RF)可以與 ELISA 系統(tǒng)中的捕獲抗體及酶標(biāo)記二抗的 FC 段直接結(jié)合,從而導(dǎo)致假陽(yáng)性。解決的辦法是:用 F(ab)2 替代完整的 IgG、標(biāo)本用聯(lián)有熱變性(63℃,10 min)IgG 的固相吸附劑處理(將熱變性 IgG 加入到標(biāo)本稀釋液中同樣有效)、檢測(cè)抗原時(shí),可以用 2-巰基乙醇等加入到標(biāo)本稀釋液中,使 RF 降解。上海信帆生物提供類風(fēng)濕因子ELISA試劑盒,咨詢!
(2)補(bǔ)體 ELISA 系統(tǒng)中固相一抗和標(biāo)記二抗過(guò)程中,抗體分子發(fā)生變構(gòu),其 FC 段的補(bǔ)體 C1q 分子結(jié)合位點(diǎn)被暴露出來(lái),使 C1q 可以將二者連接起來(lái),從而造成假陽(yáng)性。解決的辦法是:用 EDTA 稀釋標(biāo)本、用 53℃,10 min 或 56℃,30 min 加熱血清使 C1q 滅活。
(3)嗜異性抗體 人類血清中含有能與嚙齒類動(dòng)物(如鼠等)Ig (s) 結(jié)合的天然嗜異性抗體,可將 ELISA 系統(tǒng)中一抗和二抗連接起來(lái),也能造成假陽(yáng)性。解決的辦法是:可在標(biāo)本稀釋液中加入過(guò)量的動(dòng)物 Ig (s) ,但加入量不足或亞類不同時(shí)無(wú)效。
(4)嗜靶抗原的自身抗體 抗球蛋白、抗胰島素等嗜靶抗原的自身抗體,有時(shí)能與靶抗原結(jié)合形成復(fù)合物,在 ELISA 方法中均可干擾抗原抗體測(cè)定結(jié)果。為避免以上情況出現(xiàn),解決的辦法是:測(cè)定前需用理化方法將其解離后再測(cè)定。
(5)醫(yī)源性誘導(dǎo)的抗鼠 Ig (s) 抗體 開(kāi)展的用鼠源性 CD3 等單克隆抗體治療,用放射性同位素標(biāo)記鼠源性抗體的影像診斷及靶向治療等新技術(shù),均有可能使這些病人體內(nèi)產(chǎn)生抗鼠抗體;另外,被 鼠等嚙齒類動(dòng)物咬傷的病人體內(nèi)也可以產(chǎn)生抗鼠 Ig (s) 抗體。這些病人 ELISA 測(cè)定時(shí)均可產(chǎn)生假陽(yáng)性。解決的辦法是:測(cè)定抗原時(shí),在標(biāo)本中加入足量的正常鼠 Ig (s) ,從而克服由于上述原因造成的假陽(yáng)性。
(6)交叉反應(yīng)物質(zhì) 類地gao辛、類 AFP 樣物質(zhì)等,是與靶抗原有交叉反應(yīng)的物質(zhì)。在用多抗測(cè)定抗原時(shí)對(duì)測(cè)定結(jié)果影響不大,但在用單克隆抗體測(cè)定抗原時(shí),如果交叉抗原決定簇正好是所用單克隆抗體相對(duì)應(yīng)的靶決定簇時(shí),也會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。
(7)標(biāo)本中其它成分的影響 血清脂質(zhì)過(guò)高、膽紅素、血紅蛋白及血液粘度過(guò)大等,均對(duì) ELISA 測(cè)定結(jié)果有干擾作用。
上海信帆生物公司主要代理產(chǎn)品:
ELISA試劑盒:進(jìn)口ELISA試劑盒,國(guó)產(chǎn)ELISA試劑盒,人elisa試劑盒,大鼠ELISA試劑盒,小鼠ELISA試劑盒等。
培養(yǎng)基:微生物培養(yǎng)基,顯色培養(yǎng)基,BD培養(yǎng)基,gibco培養(yǎng)基等。
血清:胎牛血清,人血清,動(dòng)物血清,NQBB,Hyclone,Gbico原裝血清 。
生物試劑:Amresco,Sigma,ABM,BIO-RAD,BD,ABCAM等進(jìn)口試劑。
標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照品:進(jìn)口對(duì)照品,進(jìn)口對(duì)照藥材,進(jìn)口標(biāo)準(zhǔn)品.
抗體:一抗,二抗,流式抗體等。
放免試劑盒:進(jìn)口放免試劑盒,國(guó)產(chǎn)放免試劑盒,進(jìn)口美國(guó)鳳凰等放免試劑盒。
實(shí)驗(yàn)室代測(cè)服務(wù):放免代測(cè),WB實(shí)驗(yàn),免疫組化代測(cè),熒光定量PCR代測(cè),病理細(xì)胞染色代測(cè),生化實(shí)驗(yàn)代測(cè)等。