久久国内精品一区二区三区|亚洲人成亚洲人成在线观看|午夜无码一区二区三区在线|日本天堂中文字幕有码

技術(shù)文章 ARTICLE 當(dāng)前位置:首頁 > 技術(shù)文章 > T細(xì)胞亞群檢測(cè)試劑盒操作步驟說明-上海信帆生物

T細(xì)胞亞群檢測(cè)試劑盒操作步驟說明-上海信帆生物

更新時(shí)間:2019-01-25   點(diǎn)擊次數(shù):3551次

T細(xì)胞亞群檢測(cè)試劑盒操作步驟說明-上海信帆生物

 

T細(xì)胞亞群檢測(cè)試劑盒,CD3CD4CD8檢測(cè)試劑盒-上海信帆生物

上海信帆生物供應(yīng)T細(xì)胞亞群檢測(cè)試劑盒,產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定,價(jià)格實(shí)惠,現(xiàn)貨。如有需要,請(qǐng)大家咨詢我司客服。


T 細(xì)胞亞群檢測(cè)試劑盒說明書
一:試劑盒組成:

1. 防脫片劑2ml
2. 固定液10ml
3. A 小鼠抗人CD3 單抗1ml
B 小鼠抗人CD4 單抗1ml
C 小鼠抗人CD8 單抗1ml
4. 生物素標(biāo)記羊抗小鼠IgG( IgG/Bio) 1.5ml × 2
5. 堿性磷酸酶標(biāo)記鏈霉卵白素(S-A/AP) 1.5ml × 2
6. A 底物增強(qiáng)劑( 40×) 200μl
B 底物液( 40× ) 200μl
C 底物緩沖液( 10× ) 800μl
7. 細(xì)胞核復(fù)染液5ml
8. 封片劑1ml
9. 記號(hào)筆1 支
10. PBS 2 包(1000ml)
二:標(biāo)本制備:
取肝素抗凝(25μl/ml)的靜脈血1~2ml,PBS 稀釋1-2 倍后,沿裝有等量淋巴細(xì)
胞分離液的試管壁混勻緩慢加至液面上層,保持兩種液體界面清晰,離心(2000
轉(zhuǎn)/分)15-20 分鐘,吸取兩液面交界處的單個(gè)核細(xì)胞層,加5 倍PBS,離心(1000
轉(zhuǎn)/分)5 分鐘,棄上清液,沉淀即為單個(gè)核細(xì)胞。利用試管中剩余的少許回流
液體(約一滴)混勻細(xì)胞,制成單個(gè)核細(xì)胞懸液。滴30μl 細(xì)胞懸液于載玻片上,
靜置2 分鐘使細(xì)胞下沉粘附于玻片上,吸去液體,快速吹干或37℃溫箱1 小時(shí)
烤干?;蛴肞BS 將單個(gè)核細(xì)胞調(diào)至2×105 個(gè)/ml,離心涂片機(jī)1000 轉(zhuǎn)離心1-2
分鐘制片,快速吹干或37℃溫箱1 小時(shí)烤干。涂片前取防脫片劑5-10μl 均勻推
片,亦可用棉簽粘取防脫片劑均勻涂于干凈玻片上,待干后制備細(xì)胞涂片,以防
掉片。
三:顯色劑的配制:
分別取A 液25ul,B 液25ul 置于干凈試管中混勻,室溫放置2-5 分鐘,加1ml
蒸餾水,混勻,再加C 液100ul 待用。
*使用前,根據(jù)所需顯色劑用量,按照以上比例現(xiàn)配現(xiàn)用。
四:標(biāo)本染色:
1. 充分干燥(室溫2 小時(shí)以上或過夜)的細(xì)胞涂片先用記號(hào)筆在標(biāo)本外畫圈,
然后滴加固定液50μl,室溫靜置2-3 分鐘,用PBS 淋洗,擦干玻片背面及細(xì)胞
外的PBS。

上海信帆生物科技有限公司
*以下反應(yīng)均需在濕盒中進(jìn)行。
2. 分別滴加抗人CD3、CD4、CD8 單抗適量(10-30μl), 4℃過夜,PBS 淋洗3
次。
3. 滴加生物素標(biāo)記抗小鼠IgG 適量(10-30μl),37℃孵育30-45 分鐘,PBS 淋
洗3 次。
4. 滴加堿性磷酸酶標(biāo)記鏈霉卵白素適量(10-30μl)37℃孵育30-45 分鐘,PBS
淋洗3 次。
5. 滴加顯色劑30-50μl,室溫顯色20-40 分鐘??稍陲@微鏡下觀察,待細(xì)胞膜上
出現(xiàn)紅色標(biāo)記物時(shí),用PBS 淋洗。
6. 滴加細(xì)胞核復(fù)染液30-50μl,30 秒后自來水淋洗。
7. 滴加封片劑,蓋片封片,鏡檢。如不需保存亦可用水替代封片劑蓋片鏡檢。
五:觀察:
高倍鏡下選取染色好的視野記數(shù)100-200 個(gè)單個(gè)核細(xì)胞,細(xì)胞表面有紅色標(biāo)記物
為陽性細(xì)胞。算出陽性率。
六:正常參考值:
正常人外周血中,陽性細(xì)胞百分率一般在:CD3,60-80%;CD4,35-55%;CD8,
20-30%;CD4/CD8 的比值在1.5-2.0 范圍內(nèi)。

T細(xì)胞亞群檢測(cè)試劑盒,CD3CD4CD8檢測(cè)試劑盒-上海信帆生物

T細(xì)胞亞群檢測(cè)試劑盒操作步驟說明-上海信帆生物

聯(lián)系我們 

地址:上海市顧戴路2988號(hào)B幢7樓
電話:021-51870610
郵箱:2409400669@qq.com
傳真:021-51870610
郵編:201108

手機(jī)
13764793648
座機(jī)
4008-013-053
021-51870610
點(diǎn)擊這里給我發(fā)消息
 

環(huán)保在線

推薦收藏該企業(yè)網(wǎng)站
马山县| 富阳市| 义乌市| 临颍县| 手机| 田阳县| 滦南县| 叶城县| 始兴县| 铅山县| 清流县| 高台县| 鹤庆县| 文化| 宜州市| 牙克石市| 岢岚县| 吉水县| 加查县| 日照市| 西昌市| 垣曲县| 南陵县| 洪江市| 措美县| 怀来县| 射阳县| 诸城市| 泽州县| 崇仁县| 龙口市| 秦皇岛市| 游戏| 巨野县| 轮台县| 鹤壁市| 嘉义县| 桐柏县| 绥德县| 高要市| 沙雅县|