凍干補(bǔ)體現(xiàn)貨,凍干補(bǔ)體的用途是什么
更新時(shí)間:2018-11-29 點(diǎn)擊次數(shù):1382次凍干補(bǔ)體現(xiàn)貨,凍干補(bǔ)體的用途是什么?上海信帆生物供應(yīng)凍干補(bǔ)體,產(chǎn)品規(guī)格0.5ml一只,一盒10只,備有大量庫(kù)存!
使用方法:每支加0.5ml蒸餾水復(fù)溶,靜置10分鐘后輕輕搖勻;滴定時(shí)用緩沖生理鹽水或緩沖液(不能含NaN3)做1:5-10倍稀釋使用,臨用現(xiàn)配。
穩(wěn)定性:4-8℃保存3年(暗處保存)
產(chǎn)品規(guī)格:0.5ml/支*10
注意事項(xiàng):請(qǐng)穿戴實(shí)驗(yàn)服及一次性手套操作。
血清總補(bǔ)體溶血活性(CH50)測(cè)定方法一、原理利用綿羊細(xì)胞與相應(yīng)抗體(溶血素)結(jié)合成的復(fù)合物,可激活血清中的補(bǔ)體,導(dǎo)致紅細(xì)胞溶解,當(dāng)紅細(xì)胞和溶血素量一定時(shí),在規(guī)定反應(yīng)的時(shí)間內(nèi),溶血程度與補(bǔ)體量及活性呈正相關(guān)。在接近50%溶血(CH50)時(shí),二者之間近似直線(xiàn)關(guān)系,故以50%溶血作為敏感的判斷終點(diǎn)。以引起50%溶血所需的小補(bǔ)體量為一個(gè)CH50U,可計(jì)算出待測(cè)血清中總的補(bǔ)體溶血活性,以CH50U/ml表示。
本實(shí)驗(yàn)主要反映補(bǔ)體經(jīng)典活化途徑的溶血功能,其結(jié)果與補(bǔ)體C1~C9各組成分的量及活性均有關(guān)。
二、試劑及配制
1.緩沖生理鹽水:(1)貯存液:Na2HPO4.12H2O2.85gKH2PO40.27gNaCl17.00g蒸餾水定容至100ml4℃保存?zhèn)溆?2)應(yīng)用液:5ml貯存液加95ml蒸餾水,再加10%硫酸鎂0.1ml,當(dāng)日配制,12小時(shí)內(nèi)使用。
2.2%綿羊紅細(xì)胞:無(wú)菌采取綿羊血液,于等量Alsever液中可保存3周。用前以緩沖液洗3次,并配成2%細(xì)胞懸液。必要時(shí)可用吸光光度法或細(xì)胞計(jì)數(shù)法使懸液細(xì)胞濃度標(biāo)準(zhǔn)化。
3.溶血素:將綿羊紅細(xì)胞溶血素(效價(jià)1:4000),用應(yīng)用液做1:2000倍稀釋(即1ml溶血素加1999ml應(yīng)用液)。
4.待測(cè)血清:新鮮血液室溫放置30min,再4℃放置60min,使血收縮,4℃離心(3000r/min)10min,取上清,-20℃保存。
三、操作步驟試管法(改良Mayer法)
1.致敏羊紅細(xì)胞:2%綿羊紅細(xì)胞加等量稀釋后的溶血素(1:2000),混勻,置37℃水浴30min。
2.稀釋血清:待測(cè)血清0.2ml,加應(yīng)用液3.8ml,稀釋度為1:20。
3.配制溶血標(biāo)準(zhǔn)管:全溶血管:2%綿羊紅細(xì)胞2ml加8ml蒸餾水,混勻。50%溶血管:取全溶血管液2ml加緩沖液2ml。
4.按表所示,依次加各成分于試管中,混勻,置37℃水浴30min,第10管為非溶血對(duì)照:補(bǔ)體CH50測(cè)定試管法
5.結(jié)果測(cè)定:取出試管,2000r/min離心10min,對(duì)照管應(yīng)不溶血。肉眼比色,選與50%溶血標(biāo)準(zhǔn)管相近二管,再用分光光度計(jì)測(cè)(波長(zhǎng)542nm、0.5cm比色杯)OD值,確定與標(biāo)準(zhǔn)管接近者為終點(diǎn)管,然后按下公式計(jì)算CH50值:血清補(bǔ)體CH50(U/ml)=(1/血清用量)×稀釋度。如第5管為終點(diǎn)管,測(cè)待測(cè)血清中CH50為66.7U/ml。血清補(bǔ)體CH50正常值為50-100U/ml。
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