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基質(zhì)金屬蛋白酶MMP2/MMP9明膠酶譜電泳檢測試劑盒的使用注意事項(xiàng)
更新時(shí)間:2018-07-12 點(diǎn)擊次數(shù):2115次基質(zhì)金屬蛋白酶MMP2/MMP9明膠酶譜電泳檢測試劑盒的使用注意事項(xiàng)
MMP檢測注意事項(xiàng):細(xì)胞培養(yǎng)基要用無血清培養(yǎng)基;樣本裂解時(shí)不含EDTA,明膠酶譜的活性受鈣離子,鋅離子,和PH值等因素的影響,因此緩沖液 配制應(yīng)嚴(yán)格準(zhǔn)確,盡量用超純水,孵育溫度也掌握好。因?yàn)闄z測蛋白活性,所以應(yīng)盡量避免蛋白變性,一般都要求冰上操作,電泳也放在冰水里進(jìn)行的。
注意事項(xiàng)說明:
1.制備聚丙烯酰胺時(shí)應(yīng)注意排除氣泡。
2.明膠酶譜的活性受鈣離子,鋅離子,和PH值等因素的影響,因此緩沖液配制應(yīng)嚴(yán)格準(zhǔn)確,盡量用超純水,孵育溫度也掌握好。
3.用大梳子。
4.孵育液的PH在7.5-7.6,復(fù)性的TRITON時(shí)間長了會(huì)有絮狀物,所以實(shí)驗(yàn)時(shí)盡量使用新鮮配置的。
5.孵育的37度不要在CO2培養(yǎng)箱中,因?yàn)闀?huì)改變孵育液的PH值,在普通孵箱即可。
6.明膠要4度保存,配好后1周內(nèi)使用。
7.樣本活性低可以延長孵育時(shí)間到48小時(shí)
基質(zhì)金屬蛋白酶MMP2/MMP9明膠酶譜電泳檢測試劑盒的使用注意事項(xiàng)