信帆生物提供:雌二醇放免實(shí)驗(yàn)代測服務(wù),雌激素放免實(shí)驗(yàn)檢測
更新時間:2018-07-03 點(diǎn)擊次數(shù):1206次信帆生物提供:雌二醇放免實(shí)驗(yàn)代測服務(wù),雌激素放免實(shí)驗(yàn)檢測。檢測時間為5-7個工作日,提供原始數(shù)據(jù),分析數(shù)據(jù),實(shí)驗(yàn)室儀器型號,標(biāo)曲,操作步驟等,咨詢!
雌二醇放免試劑盒相關(guān)資料如下:
【成分】
1. 125I-E2:1瓶,紅色液體。放射性活度<0.11MBq/瓶(100管)。
2. E2標(biāo)準(zhǔn)品:7瓶,淡黃色液體(去激素人血清配制)。濃度分別為:0;10;50;100;250;500;1000 pg/ml。
3. 兔抗-E2 抗體:1瓶,藍(lán)色液體(兔抗)。
4. 質(zhì)量血清:2瓶,淡黃色液體。參考值范圍:質(zhì)控血清Ⅰ 56.5±12.8 pg/ml
質(zhì)控血清Ⅱ 248.6±58.6pg/ml
5. 分離試劑:1瓶,懸浮液(含驢抗兔血清和PEG)。
【放射性核素半衰期】碘[125I]物理半衰期(T1/2)為59.7天。
【測定原理】
本藥盒采用競爭性放射免疫分析方法,將放射性標(biāo)記抗原和非標(biāo)記待測抗原同時與*特異抗體進(jìn)行競爭結(jié)合反應(yīng),通過分離未結(jié)合的標(biāo)記抗原,測定標(biāo)記抗原-抗體復(fù)合物的放射性計數(shù),利用標(biāo)準(zhǔn)曲線和RIA的數(shù)學(xué)模型計算樣品中待測物質(zhì)的含量。
【意義】
人體內(nèi)雌二醇是雌激素中生物活性zui強(qiáng)的雌激素。男性雌二醇由產(chǎn)生,女性則由卵巢分泌。循環(huán)血液中的雌二醇絕大部分與性激素結(jié)合球蛋白結(jié)合,在肝臟代謝,變成水溶性硫酸酯或葡萄糖醛酸酯,經(jīng)腎臟排出。男性E2水平升高主要是由或肝臟腫瘤所致。女性E2會促進(jìn)生殖上皮、乳腺、長骨的生長和第二性征的發(fā)育。測定E2對青春期前女性內(nèi)分泌疾病的診斷,對閉經(jīng)、月經(jīng)紊亂、卵巢功能評估有重要意義,是研究生殖生理和診斷不孕癥的重要手段。
【禁忌】受檢者在試驗(yàn)期間不得接受內(nèi)放射性核素檢查或治療。
【樣品采集】
取靜脈血分離血清,勿需加防腐劑及其它處理,溶血和脂血標(biāo)本影響測定結(jié)果。如不立即測量,可將血清樣品密封后,置于2-8℃或-20℃存儲。2-8℃保存不應(yīng)超過48小時;-20℃保存不超過2個月,應(yīng)避免反復(fù)凍融。
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【操作程序】
取園底聚苯乙烯試管若干,編號后按以下加樣順序表進(jìn)行加樣。加樣前所有試劑包括待測樣品要搖勻。為了加樣準(zhǔn)確各種試劑和樣品好平衡到室溫之后加樣。
加樣程序表 單位:μl
管別 試劑 | 總T管 | NSB管 | S0 管 | S1~6 管 | 樣品或質(zhì)控管 |
純化水 | — | 100 | — | — | — |
“0”標(biāo)準(zhǔn)品 | — | 100 | 100 | — | — |
S1~6標(biāo)準(zhǔn)品 | — | — | — | 100 | — |
樣品或質(zhì)控血清 | — | — | — | — | 100 |
125I-E2 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 |
兔抗-E2 抗體 | — | — | 100 | 100 | 100 |
充分混勻置37℃水浴1.5小時。 | |||||
分離試劑 | — | 500 | 500 | 500 | 500 |
充分搖勻, 3600轉(zhuǎn)/分離心20分鐘,吸棄上清液。用γ-測量儀測定各管沉淀的放射性計數(shù)。 |
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【數(shù)據(jù)處理】
1. 設(shè)S0管計數(shù)為B0,各標(biāo)準(zhǔn)管或樣品管計數(shù)為B,非特異管計數(shù)為NSB,則百分結(jié)合率計算公式為:
B/B0=(B-NSB)/( B0-NSB)×100%
以上各標(biāo)準(zhǔn)品B/B0%為縱軸,以相應(yīng)濃度為橫軸,在logit-log或半對數(shù)坐標(biāo)紙上繪制劑量反應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)曲線,待測樣品濃度可在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出。
2. 計算機(jī)處理:采用RIA數(shù)據(jù)處理軟件,選擇合適的數(shù)學(xué)模型計算結(jié)果。
【技術(shù)指標(biāo)】
- 非特異結(jié)合率(NSB):<5%
- 零管結(jié)合率:> 30%
- 靈敏度:<5 pg/ml。
- 精密度:批內(nèi)變異系數(shù)<10%,批間變異系數(shù)<15%。
- 準(zhǔn)確度:回收率94-109%.
- 標(biāo)準(zhǔn)曲線:相關(guān)系數(shù)>0.990。
- 單位換算:(pmol/ml)=(pg/ml)×3.67
【注意事項】
- 所有試劑包括待測樣品事先應(yīng)在室溫平衡。使用時須充分搖勻。
- 分離試劑在2~8℃保存,不可冰凍。
- 離心速度可用3000轉(zhuǎn)/分,但至少30分鐘。離心時機(jī)內(nèi)溫度在4~25℃之間。
- 不同批號試劑不能混合使用,建議樣品做雙管檢驗(yàn)。
- 本實(shí)驗(yàn)使用放射性同位素,操作應(yīng)由經(jīng)過培訓(xùn)的專業(yè)技術(shù)人員按放免檢驗(yàn)的規(guī)定進(jìn)行。產(chǎn)生的放射性廢物應(yīng)按國家有關(guān)規(guī)定處理。
【正常參考值】
男:青春期前:<10 pg/ml 女:青春期前:<8 pg/ml
成 人 :<70 pg/ml 卵泡期:10-90 pg/ml
排卵期:100-500 pg/ml
黃體期:50-240 pg/ml
絕經(jīng)期:<60 pg/ml
各實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)本實(shí)驗(yàn)室條件和接觸的人群建立自己的正常值范圍。以上數(shù)據(jù)僅供參考。
【貯藏】2~8℃遮光保存,常溫運(yùn)輸5天內(nèi)不影響藥盒質(zhì)量。
【有效期】一個月
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