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雌二醇(E2)放免試劑盒怎么使用才符合操作規(guī)范

更新時間:2021-01-11   點擊次數(shù):1159次

雌二醇(E2)放免試劑盒怎么使用才符合操作規(guī)范

 

英文名:Iodine [125I] Estradiol Radioimmunoassay Kit

漢語拼音:Dian[125I] Ci’erchun Fangshemianyifenxi Yaohe

簡稱:典125I]-E2放免藥盒

【成分】

1. 125I-E2:1瓶,紅色液體。放射性活度<0.11MBq/瓶(100管)。

2. E2標準品:7瓶,淡黃色液體(去激素人血清配制)。濃度分別為:0;10;50;100;250;500;1000 pg/ml。

3. 兔抗-E2 抗體:1瓶,藍色液體(兔抗)。

4. 質(zhì)量血清:2瓶,淡黃色液體。參考值范圍:質(zhì)控血清Ⅰ 56.5±12.8 pg/ml

                                       質(zhì)控血清Ⅱ 248.6±58.6pg/ml

5. 分離試劑:1瓶,懸浮液(含驢抗兔血清和PEG)。

【放射性核素半衰期】典[125I]物理半衰期(T1/2)為59.7天。

【測定原理】

    本藥盒采用競爭性放射免疫分析方法,將放射性標記抗原和非標記待測抗原同時與*特異抗體進行競爭結(jié)合反應(yīng),通過分離未結(jié)合的標記抗原,測定標記抗原-抗體復(fù)合物的放射性計數(shù),利用標準曲線和RIA的數(shù)學模型計算樣品中待測物質(zhì)的含量。

【意義】

人體內(nèi)雌二醇是雌激素中生物活性zui強的雌激素。男性雌二醇由產(chǎn)生,女性則由卵巢分泌。循環(huán)血液中的雌二醇絕大部分與性激素結(jié)合球蛋白結(jié)合,在肝臟代謝,變成水溶性硫酸酯或葡萄糖醛酸酯,經(jīng)腎臟排出。男性E2水平升高主要是由或肝臟腫瘤所致。女性E2會促進生殖上皮、乳腺、長骨的生長和第二性征的發(fā)育。測定E2對青春期前女性內(nèi)分泌疾病的診斷,對閉經(jīng)、月經(jīng)紊亂、卵巢功能評估有重要意義,是研究生殖生理和診斷不孕癥的重要手段。

【禁忌】受檢者在試驗期間不得接受內(nèi)放射性核素檢查或治療。

【樣品采集】

取靜脈血分離血清,勿需加防腐劑及其它處理,溶血和脂血標本影響測定結(jié)果。如不立即測量,可將血清樣密封后,置于2-8℃或-20℃存儲。2-8℃保存不應(yīng)超過48小時;-20℃保存不超過2個月,應(yīng)避免反復(fù)凍融。

雌二醇放免試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng),雌二醇放免試劑盒的使用說明書

【操作程序】

園底聚苯乙烯試管若干,編號后按以下加樣順序表進行加樣。加樣前所有試劑包括待測樣品要搖勻。為了加樣準確各種試劑和樣品好平衡到室溫之后加樣。

加樣程序表                                                               單位:μl

          管別

試劑

總T管

NSB管

S0 管

S1~6 管

樣品或質(zhì)控管

純化水

100

“0”標準品

100

100

S1~6標準品

100

樣品或質(zhì)控血清

100

125I-E2

100

100

100

100

100

兔抗-E2 抗體

100

100

100

充分混勻置37℃水浴1.5小時

分離試劑

500

500

500

500

    充分搖勻, 3600轉(zhuǎn)/分離心20分鐘,吸棄上清液。用γ-測量儀各管沉淀的放射性計數(shù)。

【數(shù)據(jù)處理】

1. 設(shè)S0管計數(shù)為B0,各標準管或樣品管計數(shù)為B,非特異管計數(shù)為NSB,則百分結(jié)合率計算公式為:

B/B0=(B-NSB)/( B0-NSB)×100%

    以上各標準品B/B0%為縱軸,以相應(yīng)濃度為橫軸,在logit-log或半對數(shù)坐標紙上繪制劑量反應(yīng)標準曲線,待測樣品濃度可在標準曲線上查出。

2. 計算機處理:采用RIA數(shù)據(jù)處理軟件,選擇合適的數(shù)學模型計算結(jié)果。

技術(shù)指標

  • 非特異結(jié)合率(NSB):<5%
  • 零管結(jié)合率:> 30%
  • 靈敏度<5 pg/ml。
  • 精密度:批內(nèi)變異系數(shù)<10%,批間變異系數(shù)<15%。
  • 準確度:回收率94-109%.
  • 標準曲線:相關(guān)系數(shù)>0.990。
  • 單位換算:(pmol/ml)=(pg/ml)×3.67

【注意事項】

  • 所有試劑包括待測樣品事先應(yīng)在室溫平衡。使用時須充分搖勻。
  • 分離試劑在2~8℃保存,不可冰凍。
  • 離心速度可用3000轉(zhuǎn)/分,但至少30分鐘。離心時機內(nèi)溫度在4~25℃之間。
  • 不同批號試劑不能混合使用,建議樣品做雙管檢驗。
  • 本實驗使用放射性同位素,操作應(yīng)由經(jīng)過培訓的專業(yè)技術(shù)人員按放免檢驗的規(guī)定進行。產(chǎn)生的放射性廢物應(yīng)按國家有關(guān)規(guī)定處理。

【正常參考值】

   男:青春期前:<10 pg/ml           女:青春期前:<8 pg/ml

       成   人 :<70 pg/ml               卵泡期:10-90 pg/ml

                                         排卵期:100-500 pg/ml

                                         黃體期:50-240 pg/ml

                                         絕經(jīng)期:<60 pg/ml

   各實驗室應(yīng)根據(jù)本實驗室條件和接觸的人群建立自己的正常值范圍。以上數(shù)據(jù)僅供參考。

【貯藏】2~8℃遮光保存,常溫運輸5天內(nèi)不影響藥盒質(zhì)量。

【有效期】一個月

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