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十六烷基*基溴化銨(CTAB)的使用方法

更新時間:2018-04-25   點擊次數(shù):2248次

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十六烷基*基溴化銨(CTAB)呈白色或淺黃色結晶體至粉末狀,有刺激氣味,易溶于異丙醇,可溶于水,震蕩時產(chǎn)生大量泡沫,能與陰離子、非離子、兩性表面活性劑有良好的配位性。具有優(yōu)良的滲透、柔化、乳化、抗靜電、生物降解性及殺菌等性能。

    CTAB是一種去污劑,可溶解細胞膜,它能與核酸形成復合物,在高鹽溶液中((0.7 mol/L NaCl)是可溶的,當降低溶液鹽濃度到一定程度(0.3 mol/L NaCl)時,從溶液中沉淀,通過離心就可將CTAB-核酸的復合物與蛋白,多糖類物質分開。zui后通過乙醇或異丙醇沉淀DNA,而CTAB溶于乙醇或異丙醇而除去。

1、用CTAB提取提DNA的配方:

Tris-HCl(pH8.0)提供一個緩沖環(huán)境,防止核酸被破壞;

EDTA螯合Mg2+或Mn2+離子,抑制DNase活性;

NaCl 提供一個高鹽環(huán)境,使DNA充分溶解,存在于液相中;

β-巰基乙醇是抗氧化劑,有效地防止酚氧化成醌,避免褐變,使酚容易去除基因組DNA。

CTAB 4g

NaCl 16.364 g

1M Tris-HCl 20ml( PH8.0)

冷卻后0.2-1%2-巰基乙醇(400ul)氯方-異戊醇(24:1):先加96ml氯方,再加4ml異戊醇,搖勻即可。

2、用CTAB提取提RNA的配方:

2% CTAB(W/V)

2%聚乙烯吡咯烷酮PVP(W/V)

100 mM Tris-HCl(pH8.0,DEPC處理的水配制)

25mM EDTA

由于在高溫滅菌條件下,Tris-HCl要和DEPC發(fā)生反應,所以配RNA提取緩沖液時直接用DEPC 處理的水配制即可。

十六烷基*基溴化銨(CTAB)的使用方法

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