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甘油三酯(TG)含量測(cè)定試劑盒太好了!

更新時(shí)間:2017-11-23   點(diǎn)擊次數(shù):1523次

甘油三酯(TG)含量測(cè)定試劑盒太好了!

產(chǎn)品內(nèi)容:

規(guī)格:50 管/48 樣
試劑內(nèi)容:
試劑一:液體×1 瓶,4℃保存。
試劑二:液體×1 瓶,4℃保存。
試劑三:液體×1 瓶,4℃保存。
試劑四:液體×1 瓶,4℃避光保存。
試劑五:液體×1 瓶,4℃避光保存。
試劑六:液體×1 瓶,4℃避光保存。
標(biāo)準(zhǔn)品:液體×1 支,1mg/mL 標(biāo)準(zhǔn)甘油三酯溶液,4℃保存。
產(chǎn)品說明:
TG 是長(zhǎng)鏈脂肪酸和甘油形成的脂肪分子,不僅是細(xì)胞膜的主要成分,也是重要呼吸底物。 測(cè)
定原理: 用異丙醇抽提取TG,KOH 皂化TG 后水解生成甘油及脂肪酸,過碘酸氧化甘油生成甲醛,
在氯離子存在下甲醛與乙酰丙酮縮合生成黃色物質(zhì),在420 nm 有特征吸收峰,其顏色的深淺與TG
含量成正比。
自備儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、1ml 玻璃比色皿、雙蒸水
操作步驟:
一、TG 的提?。?br />1、 組織:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL
試劑一)進(jìn)行冰浴勻漿,8000g,4℃離心10min,取上清待測(cè)。
2、 細(xì)胞、細(xì)菌:先收集400-500 萬細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,加1mL 試劑一,超聲波破碎
1min(強(qiáng)度20%,超聲2s,停1s),8000g, 4℃離心10min,取上清待測(cè)。
3、 血清(漿)等液體樣品:直接測(cè)定。

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二、測(cè)定操作:
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到420 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 水浴鍋預(yù)熱到65℃。

空白管 標(biāo)準(zhǔn)管 測(cè)定管

雙蒸水(μ l) 100
1mg/ml 標(biāo)準(zhǔn)液(μ l) 100
TG 待測(cè)液(μ l) 100
試劑一(μ l) 1250 1250 1250
試劑二(μ l) 250 250 250
加試劑一后充分混勻,再加試劑二,劇烈振蕩30s,靜置,待分層后取上層溶液0.15mL,置于
新的EP 管中。
3.甘油三酯含量測(cè)定:
空白管 標(biāo)準(zhǔn)管 測(cè)定管
上層溶液(μ l) 150 150 150
試劑三 (μ l) 500 500 500
試劑四(μ l) 150 150 150
充分混勻,65℃水浴3min
試劑五(μ l) 500 500 500
試劑六(μ l) 500 500 500
充分混勻,65℃水浴15min
取出EP 管,待冷卻后,于420nm 處比色,記為A 空,A 標(biāo)和A 測(cè)。
注意:空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測(cè)定一次。
3. zui低檢出限為100μ mol/L。

注意事項(xiàng):
1. 試劑盒中有易揮發(fā)性物質(zhì),實(shí)驗(yàn)過程中需佩戴手套和口罩,試劑瓶蓋打開后應(yīng)該及時(shí)蓋緊。
2. 加試劑二后需劇烈震蕩,使待測(cè)液中甘油三酯得到充分提取。

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