久久国内精品一区二区三区|亚洲人成亚洲人成在线观看|午夜无码一区二区三区在线|日本天堂中文字幕有码

技術(shù)文章 ARTICLE 當(dāng)前位置:首頁(yè) > 技術(shù)文章 > 上海信帆生物:免疫組化實(shí)驗(yàn)中遇到的問(wèn)題分析

上海信帆生物:免疫組化實(shí)驗(yàn)中遇到的問(wèn)題分析

更新時(shí)間:2016-06-15   點(diǎn)擊次數(shù):959次

問(wèn)題及其解答:如何降低非特異性熒光染色和避免陰性著色?

1、非特異性染色產(chǎn)生原因及其解決方案:

(1)游離熒光素殘留在二抗中。一部分熒光素未與蛋白質(zhì)結(jié)合,形成了聚合物和衍化物,而不能被透析除去。二抗配置時(shí)用透析法或?qū)游龇ǚ蛛x熒光素標(biāo)記的二抗和游離的二抗。購(gòu)買(mǎi)高質(zhì)量、高純度的熒光素二抗。

(2)抗體以外的血清蛋白與熒光素結(jié)合形成熒光素脲蛋白,可與組織成分結(jié)合。

(3)組織抗原封閉不全。除去檢查的抗原以外,組織中還可能存在類(lèi)屬抗原(如Forssman氏抗原),可與組織中特異性抗原以外之之相應(yīng)抗體結(jié)合。延長(zhǎng)血清封閉時(shí)間。

(4)從組織中難于提純抗原性物質(zhì),所以制備的免疫血清中往往混雜一些抗其他組織成分的抗體,以致容易混淆。

 (5)抗體分子上標(biāo)記的熒光素分子太多,這種過(guò)量標(biāo)記的抗體分子帶過(guò)多的陰離子,可吸附于正常組織上而呈現(xiàn)非特異性染色。

(6)熒光素不純、標(biāo)本固定不當(dāng)?shù)取?/p>

(7)一抗和二抗孵育條件和濃度不合適。調(diào)整一抗和二抗孵育條件和濃度至zuijia。

(8)一抗和二抗孵育后的清洗不充分。增加清洗次數(shù)和延長(zhǎng)清洗時(shí)間。

2、陰性染色產(chǎn)生的原因有:

(1)一抗和二抗?jié)舛炔缓线m或孵育條件不妥。

(2)熒光素提前衰退。熒光素質(zhì)量不佳或操作過(guò)程中沒(méi)有注意避光等防止熒光素衰退的事項(xiàng)。

(3)血清封閉時(shí)間過(guò)長(zhǎng)。

(4)抗體稀釋液PH值不合適,影響抗原抗體反應(yīng)。

(5)組織切片不平、裂片或脫片很?chē)?yán)重,易引起大塊陰性著色。

(6)組織標(biāo)本不新鮮或已經(jīng)冷凍組織制成的切片中抗原易彌散,易引起本來(lái)表達(dá)的部位陰性染色或弱著色。

(7)熒光顯微鏡不會(huì)使用,激發(fā)波長(zhǎng)選擇錯(cuò)誤。

elisa試劑盒,人血清,放射免疫試劑盒,PCR代測(cè),WB代測(cè),放射免疫代測(cè),進(jìn)口ELISA試劑盒,酶聯(lián)免疫代測(cè),酶聯(lián)免疫試劑盒,染色液-上海信帆生物

聯(lián)系我們 

地址:上海市顧戴路2988號(hào)B幢7樓
電話(huà):021-51870610
郵箱:2409400669@qq.com
傳真:021-51870610
郵編:201108

手機(jī)
13764793648
座機(jī)
4008-013-053
021-51870610
點(diǎn)擊這里給我發(fā)消息
 

環(huán)保在線

推薦收藏該企業(yè)網(wǎng)站
金坛市| 沙河市| 萨嘎县| 通州区| 襄城县| 田东县| 驻马店市| 河北省| 定安县| 封丘县| 阜新市| 科技| 安阳县| 墨竹工卡县| 乐东| 开江县| 自贡市| 河东区| 碌曲县| 宁武县| 宝坻区| 成安县| 景泰县| 胶南市| 商水县| 贡嘎县| 咸阳市| 遂宁市| 宁陵县| 嵊泗县| 东乡族自治县| 定西市| 利津县| 安顺市| 四子王旗| 柳州市| 赤水市| 汉源县| 兖州市| 阿鲁科尔沁旗| 昆山市|