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上海信帆生物:蛋白質(zhì)電泳-在蛋白質(zhì)組學(xué)中的應(yīng)用

更新時(shí)間:2016-04-27   點(diǎn)擊次數(shù):1149次

原 理 
蛋白質(zhì)分子在溶液中由于其末端氨基、末端羧基及側(cè)鏈的游離基團(tuán)而成為帶電顆粒,并可在電場(chǎng)內(nèi)移動(dòng),其移動(dòng)方向取決于蛋白質(zhì)分子所帶靜電荷。不同蛋白質(zhì)分子根據(jù)其氨基酸組成及所在溶液的pH值,攜帶的靜電荷不盡相同,致使它們?cè)陔妶?chǎng)中的遷移率各異,從而達(dá)到分理的目的。
電泳原理示意圖

在蛋白質(zhì)組學(xué)中對(duì)電泳的分類(lèi)

一維電泳(one dimensional gel electrophoresis, 1DE),現(xiàn)在普遍采用垂直板聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)
二維電泳(two-dimensional gel electrophoresis, 2DE),又稱雙向電泳

一維電泳
現(xiàn)在普遍采用聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE),包括非變性電泳(native PAGE)和SDS-PAGE兩種,前者主要是在分離蛋白復(fù)合物時(shí)經(jīng)常用到。后者是在凝膠與緩沖系統(tǒng)中加入陰離子表面活性劑十二烷基硫酸鈉(SDS),蛋白質(zhì)分子被大量SDS陰離子包裹,消除了它們間原來(lái)攜帶的電荷差別,因而其遷移率僅反映蛋白質(zhì)分子大小,故廣泛用于蛋白質(zhì)分子量的測(cè)定。
凝膠濃度和蛋白質(zhì)分離范圍

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