上海信帆生物:MEM培養(yǎng)液出現(xiàn)沉淀問題解析
更新時間:2016-04-13 點(diǎn)擊次數(shù):1092次配的mem培養(yǎng)液,4度攪拌過夜后凍存,(GIBICO,含非必需氨基酸),凍融后有好多沉淀,結(jié)晶狀。碳酸氫鈉加的量稍微少了一點(diǎn),會是它的問題嗎?補(bǔ)充:培養(yǎng)液沒有污染,不知道這些結(jié)晶對細(xì)胞生長會不會有影響?
問題分析:
1.配MEM不需要4度攪拌過夜吧,更不需要凍存。Gibco的粉劑溶于超純水并充分?jǐn)嚢瑁偌悠渌摷拥臇|西,過濾后就行了,通常避光保存在4度就沒問題了,不知道你的沉淀是否是因?yàn)閯尤诋a(chǎn)生的;
2.可能是是污染了!配MEM沒有攪拌過夜的,一般攪拌四個小時就足夠了!而且,配好的培養(yǎng)基不需要凍存。如果培養(yǎng)基中已加抗生素,可以把培養(yǎng)基作培養(yǎng)檢驗(yàn)時,培養(yǎng)36小時以上,這樣沒有污染才真是沒有污染。
3.配好的培養(yǎng)液在-20度凍存在水浴溶解后,由于里面加的碳酸氫鈉可能會沉淀析出,呈絮狀結(jié)晶,看起來好像是雜質(zhì)(實(shí)際不是),把它用力搖一下,在37度水浴中加熱10分鐘左右,再加入15ml血清后,用吸管吹打混勻后,這樣大多數(shù)情況下絮狀物可消失,如果還剩少許仍然存在,只要確定沒有污染,不必過濾,就可直接使用。
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