丙酮酸激酶(PK)測試盒的組成
更新時(shí)間:2023-12-06 點(diǎn)擊次數(shù):182次丙酮酸激酶(PK)測試盒的組成
(測血清、血漿、組織)
一、測定原理:
丙酮酸激酶(pyruvate kinase. PK)在 ADP 存在下可
催化 PEP 產(chǎn)生丙酮酸,丙酮酸再由 LDH 將其轉(zhuǎn)變?yōu)槿?/span>
酸,同時(shí)將 NADH 變?yōu)?/span> NAD。
二、試劑組成與配制:(50 管/48 樣)
試劑一:液體 60mL×1 瓶,4℃保存。
試劑二:粉劑×2 支,-20℃保存,每支用時(shí)加雙蒸水
1.4mL,用不完放-20℃以下保存 3~7 天。(如
果你的樣本量少,可以將配好的 1.4mL 再分
成 2~3 管放-20℃以下保存,每次取一管用,
以免反復(fù)凍融)
試劑三:液體×4 支,4℃保存,不可冷凍,用不完的仍
放 4~8℃保存。
試劑四:粉劑×4 支,-20℃保存,用時(shí)每支加雙蒸水
320µL,用不完放-20℃以下保存。
試劑五:粉劑×4 支,-20℃保存,用時(shí)每支加雙蒸水
650µL,用不完放-20℃以下保存。
三、操作過程:
1、樣本前處理:
①、血清(漿)樣本:直接檢測。
②、組織樣本:準(zhǔn)確稱取組織重量按重量(g)
:體積(mL)
=1:9 的比例,加入 9 倍體積的生理鹽水,冰
水浴條件下機(jī)械勻漿,制成 10%勻漿,2500
轉(zhuǎn)/分,離心 10 分鐘,取上清再用生理鹽水
稀釋成適當(dāng)濃度勻漿上清待測(請(qǐng)做 1~2
個(gè)濃度的預(yù)試驗(yàn))。(取得的上清液需測蛋白
濃度,蛋白定量試劑盒本所有售)
2、操作表:
丙酮酸激酶(PK)測試盒的組成