瑞氏-姬姆薩染色液的詳細(xì)操作方法
更新時(shí)間:2022-10-25 點(diǎn)擊次數(shù):787次瑞氏-姬姆薩染色液的詳細(xì)操作方法
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
瑞氏-姬姆薩染色液是利用Romanowsky Stain技術(shù)原理改良而成的。細(xì)胞的著色過(guò)程是染料透入被染物并存留其內(nèi)部的一種過(guò)程,此過(guò)程既有物理吸附作用,又有化學(xué)親和作用。各種細(xì)胞及細(xì)胞的各種成分由于其化學(xué)性質(zhì)不同,對(duì)瑞氏-姬姆薩染色液中的酸性染料( 曙紅 )和堿性染料的親和力也不一樣。因此,標(biāo)本切片和涂片經(jīng)瑞氏-姬姆薩染色液染色后,相應(yīng)各類細(xì)胞呈現(xiàn)不同的著色,從而達(dá)到辨別其形態(tài)特征的目的。
Wright-Giemsa Staining Solution 以進(jìn)口瑞氏色素和姬姆薩色素為主要原料,通過(guò)研磨配制而成,能呈現(xiàn)出清晰的細(xì)胞染色效果。經(jīng)常用于血液和細(xì)胞涂片、骨髓細(xì)胞涂片、細(xì)菌染色。細(xì)胞質(zhì)呈紅色,細(xì)胞核及細(xì)菌呈藍(lán)色,嗜酸性顆粒呈橘紅色。
該染液的特點(diǎn): 由瑞氏-姆姆薩復(fù)合染色液和磷酸鹽緩沖液組成,等量混合使用或分別處理標(biāo)本使用。
試劑保存:原包裝未開(kāi)封染色液的有效期為2年,在有效期內(nèi)的已開(kāi)封染色液應(yīng)在開(kāi)封后12個(gè)月內(nèi)使用完,每次用后及時(shí)擰緊瓶蓋,以免揮發(fā)或變質(zhì)。 儲(chǔ)存條件:密封,陰涼通風(fēng)處避光保存。
產(chǎn)品組分
Componets 2×100ml 2×250ml 2×500ml
A液:瑞氏-姬姆薩快速染色液
Wright-Giemsa Quick Stain Kit 100ml 250ml 500ml
B液:磷酸鹽緩沖液
Phosphate Buffer 100ml 250ml 500ml
樣本要求
1、血細(xì)胞涂片染色:要求新鮮全血或EDTA(2K)抗凝血。
2、陰道分泌物(婦科白帶)涂片染色:新鮮標(biāo)本離開(kāi)人體涂片后,需盡快以火焰或酒精固定,以避免細(xì)胞變形。
3、骨髓涂片染色:涂片制成后,應(yīng)在空氣中快速搖動(dòng)或扇干,防止細(xì)胞皺縮變形或因空氣潮濕而溶血,絕對(duì)不能用高溫或火烤。
4、脫落細(xì)胞涂片染色:采取檢體并涂片,待檢涂片固定可采用自然干燥法或濕片固定液固定法(具體操作可根據(jù)不同檢體及所采用的固定液所對(duì)應(yīng)的規(guī)范操作要求進(jìn)行)。一般情況下若采用濕片固定法,標(biāo)本浸泡時(shí)間稍長(zhǎng)些,效果會(huì)更佳。若采用濕片固定液固定標(biāo)本,固定液用后需經(jīng)常過(guò)濾,更換,防止細(xì)胞交叉污染。
使用參考
1.常規(guī)方法制備血液涂片或骨髓涂片或細(xì)菌涂片,待涂片自然干燥。
2.將切片、血液涂片或骨髓涂片置于染色架上。
3.滴加適量瑞氏-姬姆薩復(fù)合染液覆蓋切片、涂片,室溫染色1分鐘。
4.滴加等量磷酸鹽緩沖液,輕輕晃動(dòng)玻片或采用其他方式混合,使磷酸鹽緩沖液與瑞氏-姬姆薩復(fù)合染液混勻室溫靜置(血涂片1-5分鐘,骨髓涂片10-30分鐘)。
5.步驟3、4亦可以采用如下方法:取瑞氏-姬姆薩復(fù)合染液和磷酸鹽緩沖液等量混合,即為瑞氏-姬姆薩工作液,滴加該工作液于血液涂片或骨髓涂片上室溫靜置1-2分鐘(骨髓片適當(dāng)延長(zhǎng)染色時(shí)間, 胸腹水等涂片, 宜在固定后加雙倍緩沖液, 淡染為好)。。
6.用磷酸鹽緩沖液等量稀釋后,沖洗玻片,時(shí)間控制在30s左右。(注:也可用自來(lái)水或蒸餾水從玻片一端輕輕沖洗)
7.干燥。
8.鏡檢:先用低倍鏡觀察血涂片,再用油鏡。
染色結(jié)果
血細(xì)胞涂片、骨髓涂片染色:紅細(xì)胞呈粉紅色,細(xì)胞核紫紅色,核仁呈藍(lán)紫色。白細(xì)胞漿中顆粒清楚,并顯示出各種細(xì)胞*的色彩。細(xì)胞質(zhì)隨著分化程度的不同,其嗜堿性程度也有變化,呈深淺不等的藍(lán)色。
注意事項(xiàng)
1、血液涂片或骨髓涂片應(yīng)厚薄均勻,以免影響染色效果。
2、涂片染色中,請(qǐng)勿先去除染液或直接對(duì)涂片用力沖洗。不能先倒掉染液,以免染料沉著于涂片上。
3、染色液可重復(fù)使用,但不能多次重復(fù),若有沉淀物應(yīng)過(guò)濾后使用。
4、染色過(guò)深可用甲醇或乙醇適當(dāng)脫色,最好不復(fù)染。
5、如果染色過(guò)深或過(guò)淺,應(yīng)調(diào)整染色時(shí)間或工作液濃度。
6、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
瑞氏-姬姆薩染色液的詳細(xì)操作方法